氨基甾体类衍生物对人K562和MEG-01慢粒白血病细胞的作用

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目的:观察氨基甾体类衍生物对人慢性粒细胞白血病K562细胞系和MEG-01细胞系的抑制增殖和诱导分化作用,并进一步探讨其作用机制。方法:采用液体培养实验和CCK-8试剂盒检测来观察氨基甾体类衍生物对K562细胞及MEG-01细胞的抑制增殖能力;采用Wright染色及细胞表面CD71、CD41表面标记物的检测来观察氨基甾体类衍生物对K562及MEG-01细胞系的诱导分化作用;采用real-time RT-PCR实验分别检测氨基甾体类衍生物对MEG-01细胞内钙离子通道TRPC1基因mRNA表达的变化,以及对MEG-01细胞重组蛋白酪氨酸磷酸酯酶非受体1型PTPN1基因mRNA表达的变化。结果:细胞计数检测结果显示,氨基甾体类衍生物能有效地抑制K562细胞及MEG-01细胞的增殖,并呈浓度依赖性CCK-8试剂盒检测结果显示,不同的氨基甾体类衍生物都能抑制MEG-01细胞的增殖,抑制作用不完全相同。终浓度为10-6mol/L的氨基甾体类衍生物作用于K562细胞及MEG-01细胞第3d后Wright染色,镜下观察发现K562细胞体积变大,核染色质浓集变粗,核浆比例变少,有核切迹,细胞质增多,核周胞质出现淡染区,表明K562细胞发生了一定程度的分化;MEG-01细胞则表现为体积变大,核染色质浓集变粗,核浆比例变少,细胞核不规则,胞质增多,核周胞质出现淡染区,表明MEG-01细胞发生了一定程度的分化。流式细胞仪分析显示:终浓度为10-6mol/L的氨基甾体类衍生物分别作用于K562细胞和MEG-01细胞第3d,K562细胞膜上CD71表面标记及MEG-01细胞膜上CD41表面标记表达阳性率均升高。real-time RT-PCR实验结果显示:终浓度为10-6mol/L的氨基甾体类衍生物作用于MEG-01细胞第3d,提取其RNA进行逆转录及扩增,与对照组相比,细胞内钙离子通道TRPC1基因mRNA表达显著下调;MEG-01细胞重组蛋白酪氨酸磷酸酯酶非受体1型PTPN1基因mRNA表达显著上调。结论:1.氨基甾体类衍生物可以有效地抑制K562细胞及MEG-01细胞的增殖,抑制效果呈一定的浓度依赖性。2.氨基甾体类衍生物能诱导K562细胞系向红系分化,诱导MEG-01细胞向巨核系分化。3.氨基甾体类衍生物能显著下调MEG-01细胞内钙离子通道TRPC1基因mRNA表达。4.氨基甾体类衍生物能上调MEG-01细胞重组蛋白酪氨酸磷酸酯酶非受体1型PTPN1基因mRNA的表达。
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