软骨生长因子(CDGF)对关节软骨缺损修复作用的实验研究

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目的:探讨软骨生长因子(CDGF)对新西兰大白兔关节软骨缺损的修复作用。方法:选用健康成年新西兰大白兔27只。在每只兔双侧股骨的髌股关节面中心各造成一直径为3.5mm的软骨缺损,深度以穿透软骨至刚好出现渗血的软骨下骨为宜。随机将兔分为A、B、C三组。A组(18膝):注入Plruonic凝胶。B组(18膝):注入CDGF/Pluronic复合物。C组(18膝):空白对照组,不作任何处理。术后4、8、16周分批处死动物,对修复组织进行大体观察和组织学观察,根据Wakitani等制定的评分标准,采用盲法对其修复质量作出评价。采用扫描电镜观察修复组织中软骨细胞的形态及其所分泌胶原的性质、数量、排列方式。结果:CDGF/Pluronic组修复组织质量好,速度快。1.大体观察:术后4周,CDGF/Pluronic治疗组同非治疗组相似:缺损区完全充填,修复组织表面呈白色,但不规则,基底部呈深红色,与周围正常关节软骨分界清楚。术后8周治疗组表面光滑,呈粉红色,稍高起周围关节面,有一定的弹性,与周围正常关节软骨的分界模糊。非治疗组表面呈白色、棕褐色,质 软骨生长因子(CDGF)对关节软骨缺损修复作用的实验研究 地较软。CDGF/Pluronic治疗组术后 16周,缺损区肉眼难以辩 认,其色泽、质地同正常关节软骨相似,表面与正常关节面平 齐。而非治疗组术后16 周时,表面多由不规则到光滑,弹性 差,与周围正常关节软骨分界清。 2.光镜组织学检查: 治疗组(CDGP”luronic复合物)中修复的关节软骨 第4 周,缺损完全填充细胞和基质。可见边缘裂缝或断裂。 修复组织边缘细胞少,有些区域聚集软骨细胞,呈甲苯胺蓝异染 性着色。这种聚集在正常软骨临近修复组织侧亦可见。修复组织 主要由充满原形细胞的多细胞纤维软骨。第8周,与第4周相似。 修复组织主要为纤维软骨,少部分软骨呈透明样。虽然有轻度的 不连续,但表面没有严重的纤维化。第16 周,缺损基本愈合, 而且修复组织的组织学的表现与正常软骨相似。 非治疗组(P二uron i c和空白对照组)的关节软骨修复。 第4 周空白组与单纯Pluronic 组组织学表现相似。修复组 织和周边软骨之间有裂隙或不连续,然而缺损边缘的组织细胞 少,修复组织为细胞纤维组织和纤维软骨组织。无异染性着色, 呈“断桥”状改变。 第8周缺损的组织学特征与第4周相似,但修复组织与周边软骨 的整合程度降低。第16 周,空白对照组与单纯Pluronic组组织 学不能区别。修复程度有很大的变异。 将各组组织学评分进行方差分析。治疗组 *DGF” 复 合物组)得分与非治疗组(Pluronic 和空白对照组)有显著性差 异(P<0.01)。进一步采用dunnett 检验,Pluronic组与空白对 照组之间在各个时期无显著性差异(P>0.01);rhBMP-2/Pluronic 组与空白对照组在各个时期的得分有显著性差异(P狈.01人 Pluronic组和对照组扫描电镜显示大致相同,8周、16周示:修 复组织多为层状排列的纤维组织,软骨细胞少且不活跃。 CDGF/Pluronic 组:8 周、16周,修复组织中可见到多数较成熟 2 软骨生长因子(CDGF)对关节软骨缺损修复作用的实验研究 的透明软骨细胞。细胞呈圆形,增殖活跃,数目较多。 结论:CDGF 能有效促进创伤性关节软骨缺损的修复。PI uronic 可作为CDGF 安全有效的载体。为临床无创伤性修复大面积和不 规则的关节软骨缺损提供一种新方法。
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