首乌藤黄酮的提取、分离纯化及生物活性研究

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首乌藤是何首乌的地上藤茎部分,它是我国的一味传统中药。本文以市售首乌藤药材为原料,采用响应曲面法优化了超声波辅助提取首乌藤黄酮的工艺;对首乌藤黄酮粗提物的乙酸乙酯萃取物,采用硅胶柱层析进行分离纯化研究;采用比色法研究了首乌藤黄酮粗提物及其各级萃取物的体外抗氧化能力以及首乌藤黄酮的抗菌效果。为首乌藤的进一步广泛开发利用提供了理论依据。主要成果包括以下几个方面:1.本文确定乙醇为最佳提取溶剂;选择影响首乌藤黄酮超声提取的三个关键因素,即超声强度、超声时间、乙醇浓度进行研究,在单因素实验基础之上,建立了首乌藤黄酮超声得率与以上三个因素的二次多项式回归模型,该模型拟合度好。最终得出的优化条件为:超声强度180w;超声时间40min;乙醇浓度52%;此条件下的得率为3.19%。2.首乌藤黄酮粗提物用不同的有机溶剂萃取分组,对乙酸乙酯萃取物用硅胶柱色谱进行分离和纯化,得到4个组分,用高效液相色谱和颜色反应对这4个组分进行了定性和定量研究,结果显示其中一个物质可能是单一物质,并且这种物质可能是黄酮或黄酮醇类物质。3.研究了首乌藤黄酮粗提物及其不同极性黄酮组分的体外抗氧化性,实验结果表明,在清除DPPH自由基体系中,清除率的大小顺序是Vc>正丁醇萃取物>乙酸乙酯萃取物>粗提物≈氯仿萃取物>水相残留物;还原能力的大小顺序是Vc>乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>氯仿萃取物>粗提物>水相残留物;对羟基自由基清除率的大小顺序是Vc>乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>氯仿萃取物>水相残留物>粗提物;对超氧阴离子自由基清除率的大小顺序是Vc>乙酸乙酯萃取物>水相残留物>氯仿萃取物≈正丁醇萃取物,且粗提物的浓度越大,清除效果越好;首乌藤黄酮粗提物对油脂氧化具有一定的抑制作用,但是弱于BHT和VE。4.首乌藤黄酮粗提物的抑菌活性实验结果显示,对金黄色葡萄球菌、肠炎沙门氏菌、鼠伤寒杆菌、李斯特杆菌的最小抑菌浓度分别为6.25%、12.5%、12.5%、3.125%;对枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、大肠杆菌的抑菌作用则很不明显。pH和紫外光对首乌藤黄酮的抑菌性均有一定程度的影响。
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