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目的:急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是威胁人类健康的严重危重症之一,其发病机理至今尚未阐明,病死率极高,为临床亟待解决的一个主要课题。本实验以大肠杆菌内毒素(其主要致病成分为脂多糖LPS)复制兔ARDS模型,通过观察模型动物病理生理及病理变化,探讨内毒素(ET)致伤机理及复方苦参的保护性作用,旨在为临床提供理论参考。方法:随机将21只新西兰白兔分为3组:对照组(A组)、致伤组(B组)和治疗组(C组),每组7只。实验前12h禁食、禁水,25%乌拉坦(4ml/kg)腹腔麻醉,分离左侧颈动脉,检测生命体征和采集血液标本,建立耳缘静脉通道用于给药。A组静脉注射生理盐水(4ml/kg),B、C两组经静脉一次性注射LPS720ug/kg体重复制兔的ARDS模型,C组同时静脉注射复方苦参注射液(4ml/kg)进行干预治疗。具体检测指标如下:1.0h、0.5h、1h、2h、4h点记录血压、呼吸等生命体征;2.0h、0.5h、1h、2h、4h点测量动脉血气;3.测定肺组织湿干重比;4.光镜下观察各组动物肺组织病理学改变;5.免疫组化方法测定各组动物肺组织髓样细胞触发性受体1(TREM-1)、髓过氧化物酶(MPO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间粘附因子-1(ICAM-1)、水通道蛋白-1(AQP-1)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果:1.A组在实验过程中各项实验指标相对平稳,三组间在实验前各项实验指标无统计学差异。2.生命体征测定:(1)呼吸:静注LPS后,B组动物出现呼吸急促,最快频率约78次/分,0.5h变化最为显著,之后呼吸频率逐渐下降;C组亦出现先快后慢的变化趋势。(2)血压:A组动物在整个实验中血压维持在93mHg以上;B组在给LPS后0.5h,血压明显下降,明显低于A组(P<0.01);C组实验后血压亦呈下降趋势,其各时点显著低于A组但明显高于B组。(3)血气分析:A组动物血气分析值均在正常范围,静注LPS后,B组兔血PaO2及Pa02/Fi02显著降低,0.5h为最低点,分别为55.23mmHg和258.7mmHg,符合ARDS诊断标准,之后随着时间延长逐渐恢复。C组兔Pa02/Fi02值在0.5h点虽然有所下降,与A组比较有差异(P<0.05),但未达到ARDS诊断标准,仍部分高于B组(P<0.01)。PaCO2在B组和C组均有下降。3.实验4h后,B组肺组织湿/干比显著高于A组(P<0.01),C组明显高于A组(P<0.01)但低于B组(P<0.05);4.肺组织光镜下病理学检查:A组肺泡结构基本正常,肺泡腔内无明显出血、渗出等;B组可见肺泡间隔增厚、充血、肺水肿表现,肺泡腔变小,其内可见红染物质渗出及散在蔟集的中性粒细胞粘壁、扣押,可见小灶性肺不张;C组肺泡间隔轻度增厚,肺泡腔较B组增大,炎细胞浸润减少,肺泡淤血水肿减轻,肺损伤轻于内毒素组。5.免疫组化方法测定TREM-1表达结果:A组中未见明显TREM-1表达;B组肺泡间隔、中性粒细胞可见大量深棕色颗粒;C组肺泡间隔、中性粒细胞可见深棕色颗粒较致伤组明显减少。6.免疫组化方法测定MPO表达结果:A组肺组织中MPO几乎无表达;B组致伤组的阳性表达产物为棕黄色,多分布在肺泡壁、肺泡间隔及中性粒细胞的细胞膜中,C组中棕黄色产物减少。7.免疫组化方法测定TNF-α表达结果:A组肺泡腔内可见少许淡黄色片状或颗粒状产物轻度表达;致伤组阳性产物呈棕黄色或深棕色,多分布在肺组织的中性粒细胞、巨噬细胞的细胞质中。C组阳性表达产物较B组减轻。8.免疫组化方法测定ICAM-1表达的结果:A组正常肺组织中无明显ICAM-1表达;B组致伤组ICAM-1明显表达,肺泡间隔、血管内皮细胞胞浆中均可见大量深棕色颗粒;C组可见数量不等的棕黄色颗粒,但数量较致伤组明显减少。9.免疫组化方法测定AQP-1表达结果:A组肺组织中无AQP-1表达;B组阳性产物呈棕黄色,主要在肺泡间隔及肺泡上皮细胞的胞浆中表达,C组肺泡腔中可见少许炎性细胞浸润,棕黄色表达产物减少,AQP-1表达减弱。10.免疫组化方法测定VEGF表达结果:A组肺组织中的VEGF水平处于低表达状态;而B组肺组织中表达明显,表达产物呈棕黄色,多分布于血管内皮细胞、肺泡上皮细胞的胞膜或胞浆中;C组肺泡间隔增厚减轻,棕黄色表达产物减少,VEGF表达减弱。结果判定:不着色为阴性,淡黄色为弱阳性(+),深棕色为强阳性(+++),中度阳性介于弱阳性与强阳性之间(++)。结论:1.一次性静脉注射LPS(720ug/kg)可以建立兔ARDS动物模型。2. ARDS时炎症反应失控,促炎反应和抗炎反应平衡失调。3.内毒素致伤组肺组织出现内皮细胞肿胀、炎性细胞浸润、微循环障碍等一系列病理生理变化。4.免疫组化方法测定TREM-1、MPO、TNF-α、ICAM-1、AQP-1、VEGF各项指标在LPS致伤组均有明显表达,在复方苦参注射液保护组表达较前减弱。5.复方苦参具有抗炎、抗应激、提高免疫力作用,对血管内皮细胞的黏附具有抑制作用,通过降低内皮细胞的通透性,维护内皮细胞的完整性,对受损肺组织起一定的保护作用。