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本实验采用薄层层析法、试管检测法,以来源于4个不同地区,6种不同寄主的17株黄芪根瘤内生菌为材料,首次对黄芪根瘤内生菌次生代谢产物化学成分做一初探。通过对每株供试菌发酵液的5个萃取相化学成分分析,发现其成分当中主要含有黄酮及其甙类、甾体及皂甙类、糖类及其甙类、氨基酸类、多肽及蛋白质,其次含有内酯香豆素、生物碱、有机酸、萜类、蒽醌类、酚性物质等成分,从而初步显示黄芪根瘤内生菌与寄主之间在次生代谢产物上具有一定的相关性。同时,为进一步研究其次生代谢产物的生物活性,本实验对每株供试菌株发酵液5个萃取相进行了抑菌活性的研究,其中抑制效果最为显著的氯仿相、乙酸乙酯相和正丁醇相3个萃取相表明17株供试菌次生代谢产物对金黄色葡萄球菌的抑制能力明显强于对大肠杆菌的抑制能力。为进一步研究其次生代谢物的抑菌活性,本实验选取其中5株抑制效果明显的菌株,测定其发酵液5个萃取相的MIC(最小抑菌浓度)和MBC(最小杀菌浓度)并进行进一步分析,结果表明:黄芪根瘤内生菌次生代谢产物中可能含有对革兰氏阳性细菌有明显抑制和致死作用的成分,而寄主为藏黄芪的根瘤内生菌次生代谢产物中主要含有这种成分,并且其成分属于化学极性偏大的成分。另外,本实验根据第二章所述实验结果筛选出在次生代谢产物多样性和抑菌活性水平上都具优势的一株菌BSD3-2。为确定其种属,并依据菌株BSD3-2次生代谢产物的研究结果,初步了解与此菌株种属关系相近菌种次生代谢产物的情况,本论文利用分子生物学手段,提取菌株BSD3-2的16SrDNA,并对其片段进行PCR扩增,而后利用Blast软件在GenBank等数据库中进行序列相似性比对,再用邻接法构建系统发育树,发现菌株BSD3-2与一参比菌株Ag. tumefaciens LMG196相似度高达100%,从而确定BSD3-2为土壤杆菌属根瘤内生菌。最后,为进一步对菌株BSD3-2次生代谢产物进行研究,本实验对其发酵液正丁醇浸膏进行了分离提取。通过大孔吸附树脂粗分离,反复硅胶柱层析细分离,从而得到单体化合物R和单体化合物M。对它们进行理化鉴定,核磁共振对其1H NMR和13C NMR谱图进行分析,借助飞行质谱MS确定其分子量,初步确定化合物R为某种长链烷烃类物质,且对金黄色葡萄球菌有抑制活性;确定化合物M为麦角甾醇,此化合物虽是已知化合物,但首次从根瘤内生菌中分离得到。