论文部分内容阅读
目的:通过对不同剂量X射线辐射后,生长发育期仔鼠肺组织抗氧化酶活性、组织结构和相关特异蛋白表达情况等动态变化的研究,探讨X射线对生长发育期动物肺组织的综合影响,为发育生物学研究和临床电离辐射疾病治疗及空间辐射防护提供实验依据。方法:选5–7日龄昆明小鼠,随机分为6组,每组32只。每日分别接受吸收剂量为0.0、0.5、2.0、3.5、5.0、6.5 Gy的X射线全身辐射一次,连续辐射三日。在辐射后1、5、10、20 d分别断头处死各组仔鼠8只,取出肺组织,研磨稀释离心后,取上清液检测SOD、GSH-PX活力及MDA、GSH含量的变化。另取各组仔鼠肺组织,采用组织学方法观察组织结构的动态变化,并测量肺泡直径和肺泡隔厚度的动态变化情况;采用免疫组织化学方法观察肺组织中Bax、KGF蛋白表达的动态变化情况,并利用图像分析软件及体视学测量方法对Bax、KGF蛋白表达强度进行定量分析。结果:1.X射线辐射影响生长发育期仔鼠肺组织SOD的活性。经0.5Gy和2.0Gy X射线辐射后仔鼠肺组织SOD活性均高于对照组,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。初期逐渐升高,后期降低且接近正常水平。经3.5Gy、5.0Gy和6.5Gy X射线辐射后仔鼠肺组织SOD活性先降低后升高,且均低于对照组,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。2.X射线辐射影响生长发育期仔鼠肺组织MDA的含量。经0.5Gy和2.0Gy X射线辐射后仔鼠肺组织MDA含量均低于对照组,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。初期逐渐降低,后期升高且接近正常水平。经3.5Gy、5.0Gy和6.5Gy X射线辐射后仔鼠肺组织MDA含量先升高后降低,且均高于对照组,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。3.X射线辐射影响生长发育期仔鼠肺组织GSH-Px的活性。经0.5Gy X射线辐射后仔鼠肺组织GSH-Px活性均高于对照组,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01),且随着时间呈下降趋势。经2.0Gy、3.5Gy、5.0Gy和6.5Gy X射线辐射后仔鼠肺组织GSH-PX活性均低于对照组,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01),且均呈先下降后逐渐恢复的趋势。4.X射线辐射影响生长发育期的仔鼠肺脏中GSH的含量。经0.5Gy X射线辐射后初期,仔鼠肺组织GSH含量均高于对照组,差异极显著(P<0.01);后期,仔鼠肺组织GSH含量降低且接近对照组,差异不显著或显著(P>0.05或P<0.05)。经2.0Gy、3.5Gy、5.0Gy和6.5Gy X射线辐射后仔鼠肺组织GSH含量降低但均低于对照组,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。5.X射线辐射影响生长发育期仔鼠肺的组织结构。经不同剂量X射线辐射后仔鼠肺泡直径和肺泡隔厚度均有不同程度的变化。经0.5Gy、2.0Gy X射线辐射后仔鼠肺间质细胞致密,肺泡直径及肺泡隔厚度与对照组相比均有不同程度的减少。经3.5Gy、5.0Gy和6.5Gy X射线辐射后肺泡直径和肺泡隔厚度与对照组相比均有不同程度的增加。6.X射线辐射影响生长发育期仔鼠肺组织中Bax蛋白的表达。Bax蛋白在各不同剂量辐射组仔鼠肺组织中均有不同程度的表达,其表达强度随辐射剂量的增大而增强,随着时间逐渐恢复至接近正常水平。7.X射线辐射影响生长发育期仔鼠肺组织中KGF蛋白的表达。KGF蛋白在各不同剂量辐射组仔鼠肺组织中均有不同程度的表达。其表达强度随辐射剂量的增大而增强,随着时间呈下降趋势且最终接近正常水平。结论:1.X射线辐射对生长发育期仔鼠的抗氧化酶活性有明显影响。小剂量X射线辐射后仔鼠肺组织中超氧化物歧化酶活性初期升高后期降低、丙二醛含量初期降低后期升高,大剂量X射线辐射后则恰好相反。小剂量X射线辐射后初期谷胱甘肽过氧化物酶活性及还原型谷胱甘肽含量均高于对照组,而后期均低于对照组,且均随着时间呈下降趋势。2.X射线辐射影响生长发育期仔鼠肺的组织结构。经不同剂量的X射线辐射后仔鼠肺泡直径和肺泡隔厚度均有不同程度的变化。小剂量X射线辐射后仔鼠肺间质细胞致密,肺泡直径及肺泡隔厚度与对照组相比均有不同程度的减少。大剂量X射线辐射后肺泡直径和肺泡隔厚度与对照组相比均有不同程度的增加。3.X射线辐射影响生长发育期仔鼠肺组织中Bax及KGF蛋白的表达。Bax及KGF蛋白在仔鼠肺组织中均有不同程度的表达,其表达强度随辐射剂量的增大而增强,对细胞损伤与修复的诱导亦增强。具体表现为:辐射初期在肺组织细胞中均有较强的阳性分布,随后Bax蛋白的表达逐渐减弱,最终恢复至接近正常水平;而KGF蛋白的表达呈下降趋势且最终接近正常水平。高剂量电离辐射可引起机体内产生大量超氧阴离子自由基(O2-.),从而造成机体组织中细胞的过氧化损伤,而低剂量的电离辐射又可诱导生物体的免疫兴奋。电离辐射还可以使机体各种免疫细胞的功能被激活,特别是T细胞的激活和分化,导致有氧代谢旺盛,产生超氧阴离子自由基高于静止状态。所以低剂量辐射后仔鼠的肺组织抗氧化酶活性升高,脂质化水平降低。而大剂量电离辐射产生的自由基由于无法及时清除而攻击细胞,致使组织损伤,抗氧化酶活性降低,Bax、KGF蛋白高度表达。而在辐射后一段时间内各组仔鼠各检测指标及组织结构均有不同程度恢复正常的趋势。表明X射线辐射影响生长发育期仔鼠肺组织抗氧化酶活性、组织结构及相关特异蛋白的表达。大剂量电离辐射对生长发育期仔鼠具有损伤作用,但机体具有一定的抗辐射机能。