抗-HBsAg卵黄抗体诱导及液相提取的研究

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本研究分为两部分,第一部分采用重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞产)免疫健康母鸡,诱导产生抗-HBsAg抗体,探讨不同免疫注射途径对抗-HBsAg抗体水平的影响作用,第二部分探讨抗-HBsAg卵黄抗体液相提取的适宜条件.免疫试验采用完全随机的试验设计方法进行试验设计,设置了三个处理与一个空白对照.第一处理为胸肌注射抗原,第二个处理为交巢注射抗原,第一处理及对照均设置10个重复.在此基础上,探讨卵黄抗体液相提取的适宜条件.免疫试验结果表明:胸肌、交巢途径两免疫组途径之间差异不显著;两句疫途径与对照在第三周后,抗-HBsAg抗体水平达极显著差异(α=0.01);抗-HBsAg抗体水平可以维持30周以上;初次免疫后第35、37周加强免疫,加强免疫后一周,抗体水平明显下降,后两周抗体水平上升.反应面统计分析液相提取试验结果表明:三因素对提取物蛋白浓度的影响效应差异显著(α=0.01);三个因素影响效应大小顺序为:温度>pH值>PEG浓度.获得OD<,450>(抗-HBsAg水平)最大值的提取条件为:PBS的pH值为7.2,PEG浓度为4.9﹪,环境温度为22℃获粗蛋白提取量极大值的提取条件为:PBS的pH值为7.0,PEC浓度为2.6﹪,环境温度为℃.
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