参杞合剂对人鼻咽癌细胞CNE凋亡及转移的影响

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目的:肿瘤的治疗仍然是医学的一大难题。目前,对肿瘤治疗方法的研究很多,传统中医中药在治疗方面有很大优势,关于这方面的研究也日趋广泛和深入。中药复方制剂参杞合剂(SQ)是在传统中药参杞片的基础上辅以黄芪、当归、莪术、白花蛇草煎制而成,其抗肿瘤的作用及机制的初步探讨已见报道,研究表明SQ在小鼠体内外均有显著的抑瘤作用。本实验通过研究参杞合剂(SQ)对人鼻咽癌细胞CNE的凋亡及转移的影响,进一步探讨对人类肿瘤作用的相关机制,这对研制高效低毒的抗瘤新药,具有重要意义。方法:取体外培养的CNE细胞,加入不同浓度的参杞合剂(0.03125~0.5g.生药/ml),培养不同时间(24h、48h、72h)后,MTT法计算抑瘤率。CNE细胞连传两代后,调整细胞浓度为5×105,加入不同浓度的参杞合剂(31.25mg/ml、62.50mg/ml、125.00mg/ml)各1ml,对照组加入等量的生理盐水,作用48h,分做以下试验。取浓度为62.50mg/ml试验组肿瘤细胞,提取DNA,经1%的琼脂糖凝胶电泳后,在凝胶成像系统下观察凋亡细胞形成的DNA条带。取三个作用浓度的细胞,试验组加入Fas-FITC单抗5μl,对照组加入同型单抗5μl,采用流式细胞术检测细胞表面Fas的表达情况。提取浓度为31.25mg/ml及62.50mg/ml作用的肿瘤细胞的RNA,计算RNA的浓度及纯度,设计并合成caspase-3、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及内参照β-actin的上游引物和下游引物,以提取的mRNA为模板,
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