角膜缝线与碱烧伤诱导兔角膜新生血管的实验观察

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目的:利用角膜缝线、碱烧伤两种常用的方法诱导兔角膜新生血管(cornealneovascularization,CNV)产生,观察角膜新生血管产生早期的过程中,角膜新生血管的生长情况及VEGF在兔角膜中的表达情况,评价两种实验方法的优缺点,指导实验方法的选择。方法:将新西兰白兔75只,随机分为三组:A组正常对照组5只;B组35只,采用角膜缝线的方法诱导产生新生血管;C组35只,采用碱烧伤方法诱导产生新生血管。每日裂隙灯显微镜观察角膜炎性反应情况与新生血管生长情况,检测第3天、7天、10、14天角膜新生血管长度和数量,计算新生血管面积,并摄影记录;B、C两组分别于手术后第1、2、3、5、7、10、14天随机取材、观察。免疫组织化学(IHC)检测VEGF在兔角膜中的表达情况。结果:角膜缝线组术后3天,新生血管开始沿缝线方向侵入角膜;7天,新生血管沿缝线生长活跃;10天,新生血管出现退化迹象;14天后新生血管退化迹象明显。碱烧伤组术后3天新生血管由多个方向长入角膜;7天,新生血管生长活跃,10天,新生血管达到角膜中心;14天,新生血管出现退化迹象。新生血管的长度两组无明显差异(P>0.05)。角膜缝线组角膜新生血管面积明显小于碱烧伤组(P<0.01)。缝线组诱导产生的新生血管累及的角膜圆周钟点数为4至5个钟点;碱烧伤组诱导产生的新生血管累及的角膜圆周钟点数在7至12个钟点。VEGF蛋白的表达在术后1、2、3、5天B、C两组无明显差异(P>0.05),7、10、14天VEGF在碱烧伤组的表达明显高于缝线组(P<0.01)。结论:碱烧伤组诱导产生的角膜新生血管面积要大于缝线组;碱烧伤组角膜新生血管退化的时间晚于缝线组,这与7天后碱烧伤组VEGF的表达高于缝线组有关;角膜缝线的方法更容易控制角膜新生血管产生的方向和范围。
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