靶向PRL-3基因的miR-495、miR-551a及其抗胃癌细胞侵袭转移研究

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mldn2006
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目的:在胃癌中预测并验证可能调控腹膜转移相关基因PRL-3表达的microRNA(miRNA)分子。方法:通过生物信息学技术,运用4个miRNA靶基因预测软件,结合相关文献,选取9条高度可能靶向PRL-3的miRNA分子,用qRT-PCR方法在胃癌组织和胃癌细胞系SGC7901、MKN45、MKN28、BGC823及正常胃黏膜组织和胃黏膜上皮细胞系GES-1、HFE-145中检测这9条miRNA分子表达情况,得出两条在胃癌组织及胃癌细胞中表达下调最明显的miRNA分子(miRNA-551a、miRNA-495),设计并合成这2种miRNA分子化学合成类似物miRNA mimics,分别用Lipofectamine2000TM脂质体将miRNAmimics瞬时转染到SGC7901、MKN28细胞,设立空白对照组及阴性对照组,用qRT-PCR技术检测转染24小时后PRL-3mRNA的表达情况,用Western Blot方法检测转染后细胞中PRL-3蛋白水平变化。Transwell小室实验检测转染后SGC7901、MKN28细胞侵袭及转移能力变化。结果:胃癌细胞SGC7901和MKN28在瞬时转染miR-495/miR-551a mimics后,均明显抑制了PRL-3蛋白及mRNA的表达,tranwell侵袭迁移实验表明,在转染miR-495/miR-551a mimics后,胃癌细胞的侵袭和迁移能力均明显下降。结论: miRNA-551a、miRNA-495为靶向PRL-3基因的miRNA分子,这丰富了miRNAs及PRL-3基因的调控机制研究,并为今后运用miRNA治疗进展期胃癌提供了有力的理论依据。
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