冬虫夏草（Cordyceps sinensis）是我国特有的名贵中药，被广泛应用于各种疾病的辅助治疗。本次实验利用虫草菌的胞外多糖（EPS）来进行免疫功能和抗肿瘤作用的研究。 第一部分虫草菌胞外多糖对荷瘤小鼠的免疫调节和抗肿瘤作用 目的：研究虫草菌胞外多糖对荷B16黑色素瘤C57BL／6小鼠和荷H22肝癌ICR小鼠的免疫调节和抗肿瘤作用 方法：1.30只C57BL／6小鼠被随机分为5组（每组3只雄性和3只雌性），分别为对照组、肿瘤未治疗组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。除对照组外，以1.5×10<6>／ml浓度的B16肿瘤细胞通过尾静脉接种（0.1m1／只）。每2天用腹腔注射的方法给药一次；正常对照组和肿瘤未治疗组给生理盐水，药物组给以生理盐水溶解的胞外多糖，剂量分别为30 mg／kg、60 mg／kg和120 mg／kg。2.30只ICR小鼠被随机分为5组（每组3只雄性和3只雌性），分别为对照组、肿瘤未治疗组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。除对照组外，各组将1×10<7>／ml浓度的H22小鼠肝癌细胞从小鼠右腋下皮下注射（0.2 ml／只）。以腹腔注射的方法每天给药一次，对照组和肿瘤组给以生理盐水，药物组剂量分别为15 mg／kg、30 mg／kg和60 mg／kg。3.测定C57BL／6小鼠肺和肝脏的肿瘤转移结节数目，测定ICR小鼠的肿瘤重量。4．采用中性红吞噬试验，测定C57BL／6小鼠和ICR小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力，应用MTT比色法小鼠脾淋巴细胞和胸腺淋巴细胞增殖能力。5．应用流式细胞法测定C57BL／6小鼠外周血CD4+／CD8+T淋巴细胞比值的变化。6．应用ELISA方法测定ICR小鼠血清中TNF－α的含量。7．采用免疫组化的方法测定C57BL／6小鼠和ICR小鼠肺脏和肝脏中肿瘤相关基因（bcl-2、VEGF、c-fos和c-myc）的表达 结果：1．EPS能降低C57BIL／6小鼠肝脏和肺脏肿瘤结节数。2．EPS可以使ICR小鼠肿瘤重量降低。3．EPS能促进C57BL／6小鼠和ICR小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬中性红能力和对脾和胸腺淋巴细胞的增殖能力。4．流式细胞仪的检测表明EPS对C57BL／6小鼠CD4+／CD8+T淋巴细胞比值变化无影响。5．ELISA结果显示在EPS最高剂量可提高ICR小鼠血清中TNF—Q的含量。6．免疫组化结果表明EPS可以抑制肿瘤相关基因（Bcl-2、VEGF、c-fos和c-myc）的表达 结论：从EPS使实验小鼠肿瘤转移结节数和肿瘤重量的减少，可以初步判断EPS对于肿瘤的治疗具有一定的效果，而EPS可以下调肿瘤相关基因的表达也证明了EPS对于肿瘤的治疗是有效果的。EPS增加了脾和胸腺淋巴细胞增殖能力、腹腔巨噬细胞的吞噬中性红能力及血清中TNF—Q的含量，提示EPS可能是主要通过免疫系统功能的增强来抑制肿瘤的生长和转移。 第二部分 虫草菌胞外多糖对体外培养免疫细胞的作用 目的：研究虫草菌胞外多糖对体外培养C57BL／6小鼠和ICR小鼠免疫细胞的作用 方法：1．采用中性红吞噬试验，测定EPS对（］57BL／6小鼠和ICR小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力的影响。2．采用MTT比色法，测定EPS对C57BL／6小鼠和ICR小鼠腹腔巨噬细胞杀伤肿瘤相比活性的影响。3．用MTT比色法测定EPS对（；57BIL／6小鼠和ICR小鼠脾和胸腺淋巴细胞的增殖能力的影响。 结果：1．EPS能增加C57BL／6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力、杀伤B16黑色素肿瘤细胞的活性和胸腺淋巴细胞的增殖能力。2．EPS能增加ICR小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬中性红的能力、杀伤}t22肿瘤细胞的活性和脾和胸腺淋巴细胞的增殖能力。 结论：EPS可提高体外培养的腹腔巨噬细胞吞噬中性红的能力，提高腹腔巨噬细胞杀伤肿瘤细胞的活性以及胸腺和脾脏淋巴细胞的增殖能力。虫草菌胞外多糖EPS具有直接促进小鼠免疫细胞功能的作用。