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目的在小鼠RAW264.7细胞破骨诱导过程中,利用LPS创造炎症环境,并加入Wnt4重组蛋白,检测Wnt4重组蛋白在炎症环境下对破骨细胞分化以及骨吸收功能的影响,为临床上预防和治疗种植体周围炎提供新的治疗思路以及实验数据。方法1、将小鼠RAW264.7细胞与不同浓度的LPS（0、50、100、200、500、1000ng/ml）、Wnt4（0、50、100、200、500、1000、2000ng/ml）分别培养后用CCK-8法检测不同浓度LPS、Wnt4对于RAW264.7细胞活性的影响。2、建立破骨细胞模型,通过诱导小鼠RAW264.7细胞,获得成熟的破骨细胞,并通过形态学观察、TRAP染色对其进行鉴定。3、将小鼠RAW264.7细胞分为四组:对照组（完全培养基）,LPS组（完全培养基+100ng/ml LPS）,破骨诱导组（完全培养基+100ng/mlLPS+100ug/L RANKL、50ug/L M-CSF+100ng/ml LPS）和Wnt4组（完全培养基+100ng/mlLPS+100ug/L RANKL、50ug/L M-CSF+100ng/ml LPS+200ng/mlWnt4）。随后进行破骨分化检测及噬骨检测:培养5天后,进行TRAP染色计数破骨细胞数目以及骨吸收陷窝面积。培养5、7、9天后提取mRNA行RT-PCR检测Trap、Mmp9及Ctsk基因表达。评估Wnt4重组蛋白在炎性状态下对小鼠RAW264.7细胞破骨分化的影响。结果1.不同浓度LPS、Wnt4对小鼠RAW264.7细胞活性的影响LPS:24h,48h各浓度组对于RAW264.7细胞增殖均有促进作用,100ng/ml浓度组细胞增殖效果最为明显。在24小时和48小时实验组与对照组对比均有统计学意义（p＜0.05）,在实验组中100ng/ml浓度组与其他组对比均有统计学意义,培养48小时,1000ng/ml浓度组与其他实验组对比有统计学差异,其他组间对比无统计学意义（p＞0.05）。Wnt4:加入Wnt4重组蛋白培养24h后,50ng/ml、l00ng/ml、200ng/ml、500ng/ml浓度组对于细胞增殖都有促进作用,200ng/ml浓度组效果最明显,1000ng/ml对于细胞增殖几乎没有影响,2000ng/ml浓度组对细胞增殖有负面影响;48小时后,50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml、500ng/ml浓度组依然具有促进作用,1000ng/ml对于细胞增殖几乎没有影响,2000ng/ml浓度组对细胞增殖有负面影响。在24,48小时中除了 1000ng/ml浓度组与对照组对比无统计学意义（p＞0.05）,其余实验组与对照组对比均有统计学意义（p＜0.05）,24小时实验组中50ng/ml浓度组与各组组间对比有统计学意义（p＜0.05）,而在48小时实验组中50ng/ml浓度组与1000 ng/ml浓度组无统计学意义（p＞0.05）;24小时100、500ng/ml浓度组与50ng/ml浓度组无统计学意义（p＞0.05）,200ng/ml浓度组与于50ng/ml,1000ng/ml浓度组对比有统计学意义（p＜0.05）;48小时中100、500ng/ml度组与50ng/ml浓度组对比无统计学差异（p＞0.05）,200ng/ml浓度组与100ng/ml浓度组对比无统计学差异（p＞0.05）,1000ng/ml浓度组与各组均有统计学差异（p＜0.05）。2.建立破骨细胞模型RAW264.7细胞经过破骨诱导后,形态学观察法和TRAP染色法染色后都能发现有大量破骨细胞形成,且形成的破骨细胞数量（47.33±2.70个/mm2）是明显高于对照组破骨细胞数量的,两组比较差异显著,具有统计学意义（p＜0.05）。3.Wnt4在炎性炎症环境中对于小鼠RAW2 64.7细胞破骨分化的影响TRAP染色分析:破骨培养5天后,破骨诱导组形成的破骨细胞最多（47.33±2.70/mm2）,其次是LPS组（30.00±8.78个/mm2）,然后是Wnt4组（21.3±3.26个/mm2）,最后是对照组,四组两两对照差异显著,均有统计学意义（p＜0.05）。骨吸收陷窝分析:细胞在骨磨片上培养5天后,计算骨吸收陷窝面积,破骨诱导组形成的骨吸收陷窝面积最大（18.93%±2.24%）,其次是LPS组（5.69%±1.57%）,然后是Wnt4组（2.93%±1.12%）,最后是对照组,四组两两对照均有显著差异,具有统计学意义（p＜0.05）。RT-PCR检测分析:分组培养5、7、9天后测定破骨相关基因（TRAP、MMP-9和Cts-K）mRNA表达量。结果显示对照组与实验组,对比具有统计学差异（p＜0.05）;实验组两两比较,差异显著,具有统计学意义（p＜0.05）。结论200ng/ml的Wnt4重组蛋白能够在炎性炎症状态下通过下调TRAP,MMP-9,Cts-K的表达从而抑制破骨细胞的分化。