本实验的目的旨在克隆、表达可将外源蛋白或寡核苷酸等基因治疗物质带入细胞质、进而进入细胞核的载体蛋白(Carrier)。在此我们克隆表达了两个载体，先是利用能够穿过细胞质膜的蛋白转导结构域TAT，并在TAT后面连上来自猿猴病毒大T抗原的核定位信号（nuclear localization signal, NLS），然后在TAT-NLS序列的后面接上报告基因增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein, eGFP）。最后获得一个含有TAT-NLS-eGFP基因的pET-22b(+)质粒，即pET-TAT-NLS-eGFP，以该质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，并诱导表达TAT-NLS-eGFP蛋白。探讨体外克隆、表达、纯化融合蛋白TAT-NLS-eGFP的可行性，并对融合蛋白的功能进行初步鉴定。其次将编码人高迁移组蛋白2（human high mobility group protein 2 , HMGN2, 以前称HMG-17）N-末端一个片段的序列（F3序列）连上报告基因eGFP，同样获得一个含有F3-eGFP基因的pET-22b(+)质粒，即pET-F3-eGFP，然后将此质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，并诱导表达融合蛋白F3-eGFP蛋白。探讨体外克隆、表达、纯化融合蛋白F3-eGFP的可行性，并对融合蛋白的功能进行初步鉴定。<WP=9>实验结果表明，重组质粒pET-TAT-NLS-eGFP和pET-F3-eGFP可在大肠杆菌BL21(DE3)中成功地表达融合蛋白，并且可纯化到高纯度的融合蛋白。融合蛋白对体外培养细胞的成功转导表明多肽TAT-NLS和F3可以作为一种有效的转导外源蛋白的工具。