肝X受体α(LXRα)是脂质和胆固醇代谢过程中一个关键的转录调控因子,硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)则是脂肪酸去饱和过程的限速酶,SCD1和LXRα在机体中共同参与了脂质代谢调节作用,是脂质代谢的两个重要调控因子;为了揭示鸭SCD1和LXRα基因m RNA的表达效应,探明其真核表达载体对鸭原代肝细胞和PC3细胞脂质性状的影响;以鸭为试验材料,结合荧光定量PCR及鸭原代肝细胞分离培养技术,构建带HIS报告标签的鸭SCD1和LXRα基因的真核表载体,转染鸭原代肝细胞及PC3细胞,探求鸭SCD1和LXRα基因m RNA组织表达谱,分析其m RNA表达与血清脂质指标和肉质的相关性;检测鸭SCD1和LXRα基因的真核表载体的表达对鸭肝细胞脂质性状的影响,研究结果如下:1.采用qRT-PCR法检测10周龄鸭SCD1基因m RNA的组织表达谱,分析基因表达与血清脂质指标的相关性,结果表明:鸭SCD1基因m RNA表达具有组织特异性,肝脏的表达高于其他组织,相关性分析结果表明,鸭SCD1基因m RNA表达与血清甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白呈显著正相关(P<0.05),与肉质指标的相关性未达到显著水平(P>0.05)。2.通过构建pEGFP-N3-SCD-1+HIS真核表达载体,转染培养的鸭原代肝细胞和PC3细胞,双抗体夹心法测定融合蛋白中HIS的表达量来代表SCD1基因的表达量,分析SCD1蛋白表达与2种细胞脂质指标的相关性,结果表明:SCD1蛋白表达对鸭原代肝细胞和PC3细胞的甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白合成代谢呈正调控作用,但SCD1基因真核表达载体在鸭肝细胞中的表达强于PC3细胞,揭示鸭SCD1基因的蛋白水平表达可能促进细胞脂质代谢有一定作用。3.通过分析10周龄鸭LXRα基因的m RNA表达对血清脂质的效应,结果表明:LXRα基因的表达呈现明显的组织特异性,肝脏的m RNA表达明显高于其他组织,LXRα基因的m RNA表达水平与血清甘油三酯和总胆固醇呈显著正相关关系(P<0.05),与各肉质指标之间的相关不显著(P>0.05)。4.通过构建pEGFP-N3-LXRα+HIS基因真核表达载体并进行细胞转染,分析该表达载体对鸭原代肝细胞和PC3细胞脂质性状的影响,结果表明:随着鸭原代肝细胞和PC3细胞中LXRα基因蛋白水平的表达增强,甘油三酯和高密度脂蛋白的浓度增加,总胆固醇和低密度脂蛋白的浓度降低,但LXRα基因在肝细胞中的蛋白表达水平高于PC3细胞,揭示鸭LXRα基因的表达可能具有一定清道夫作用,对促进胆固醇的转化或转运代谢有一定作用。5.采用Ⅳ型胶原酶消化法提取不同生长期鸭的原代肝细胞,结果表明:鸭胚和1日龄雏鸭的肝细胞具有较强的分化增殖能力,但细胞提取量少;30日龄,肝细胞的增殖分化弱,纯度低,7-15日龄,肝细胞表现出良好的增殖分裂能力,得率高,纯度好,贴壁能力强,增殖速度快等特点,是胶原酶酶解法最佳的肝细胞离体培养肝源。