兔脾内肝细胞移植的磁共振活体示踪研究

来源 :南华大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shashasimon
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目的:本研究采用钆贝葡胺作为磁共振显像的顺磁性对比剂,对兔脾内有活性的移植肝细胞进行示踪。探讨磁共振显像能否应用于兔脾内肝细胞移植的示踪,观察不同浓度肝细胞移植的磁共振显像情况;观察相同浓度不同时段肝细胞移植的磁共振显像情况。为肝细胞脾内移植无创示踪提供理论依据,促进磁共振示踪在肝细胞移植中的应用和推广。方法:1.选择体重2.5-3.0kg新西兰白兔,采用改良Seglen胶原酶半原位灌注法分离获取成熟的肝细胞,台盼兰测定肝细胞活率,计数板计算肝细胞悬液浓度。2.实验设为7个组(6个细胞移植组及空白对照组),用PBS液将肝细胞悬液浓度调整至10~3个/ml、10~4个/ml、10~5个/ml、10~6个/ml、10~7个/ml、10~8个/ml 6种浓度,每种浓度为1组,空白对照组为生理盐水。取肝细胞悬液1ml,注射移植入兔脾实质内(每组4只)。对照组(4只)脾内注射1ml生理盐水。用地塞米松抗免疫排斥反应。移植兔1d后行磁共振扫描(行平扫及注射钆贝葡胺后1小时延迟期扫描),取出兔脾做HE染色。3.选取10~7/ml浓度的肝细胞按前面的移植步骤移植入20只兔脾内,随机分成1d组、4d组、8d组、16d组、32d组,对照组(n=4)移植1ml生理盐水。地塞米松抗免疫排斥反应。分别于移植后第1d对1d组、第4d对4d组、第8d对8d组、第16d对16d组、第32d对32d组行磁共振扫描(做平扫及注射钆贝葡胺后1小时延迟期扫描),对照组每次均行磁共振扫描,磁共振检查后将兔处死,取脾做HE染色。结果:1.各浓度组脾内移植区的MRI信号定性分析结果:平扫:对照组信号无增强,各浓度组信号均无增强。钆贝葡胺注射后1小时延迟期:对照组、10~3组信号无增强,10~4组、10~5组、10~6、10~7组、10~8组信号有增强。2.各浓度组脾内移植区MRI信号的SI定量分析结果:平扫:各浓度组之间相比,各浓度组与对照组相比,信号强度无明显差异,无统计学意义(P>0.05)。钆贝葡胺注射后1小时延迟期:各浓度组之间相比,从10~3组到10~8组信号强度依次增强,差异有统计学意义(P<0.05)。各浓度组与对照组相比,各浓度组信号强度均比对照强,差异有统计学意义(P<0.05)。3.各浓度组脾HE染色结果:各浓度组脾内均可见有完整的肝细胞,高浓度组肝细胞量明显比低浓度组多,10~8组可见大量成团肝细胞,10~3组只有稀疏的少量细胞。对照组脾内未见肝细胞。高倍镜下各浓度组细胞个数比较,从10~3组到10~8组细胞个数依次增加,差异有统计学意义(P<0.05)4.各时段组脾内移植区MRI信号定性分析结果:平扫:对照组及各时段组信号均无增强。钆贝葡胺注射后1小时延迟期:1d组、4d组、8d组、16d组、信号有增强,32d组信号有增强。5.各时段组脾内移植区MRI信号SI定量分析结果:平扫:各时段组之间相比,各浓度组与对照组相比,信号强度无明显差异,无统计学意义(P>0.05)。钆贝葡胺注射后1小时延迟期的比较:各时段组之间相比,1d组信号强度最强,以后逐渐减弱,各时段组信号差异有统计学意义(P<0.05)。各时段组与对照组相比,各时段组信号强度均比对照强,差异有统计学意义(P<0.05)。6.各时段组HE染色结果:1d组脾内大量完整肝细胞,4d组脾内肝细胞总数量较1d组少,少量坏死肝细胞。8d组肝细胞数量较4d组少,少量坏死肝细胞。32d组脾内仍有少量的肝细胞。对照组各时段均无肝细胞。高倍镜下各时段组细胞个数比较,从1d组到32d组细胞个数依次减少,差异有统计学意义(P<0.05)结论:1.脾内MRI信号强度随着移植量的增加而增高。2.脾内肝细胞数目随着移植量的增加而增多。3.脾内MRI信号强度随着移植时间的延长而递减。4.脾内肝细胞数目随着移植时间的延长而减少。5.钆贝葡胺增强后延迟期的磁共振显像能够应用于兔脾内肝细胞移植的示踪。
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