论文部分内容阅读
研究背景AIB1,又称为SRC-3,是p160核受体共激活因子家族的成员,1997年发现SRC-3在乳腺癌中扩增,被认为是乳腺癌中的重要癌基因。SRC-3最初被鉴定为核受体的转录共激活因子,例如雌激素受体(ER),参与激素依赖性肿瘤的增殖,其水平升高与肿瘤临床预后不良有关。AIB1也陆续被发现与多种肿瘤相关,包括胃癌、结直肠癌和肝癌等,介导多种非激素依赖性肿瘤相关信号通路。尽管AIB1在宫颈癌中存在过表达,但关于AIB1与宫颈癌的治疗及预后关系的研究较少。本课题将AIB1和宫颈癌联合进行研究,了解AIB1对宫颈癌放化疗耐受性的影响,评估AIB1在宫颈癌治疗中的临床意义,为宫颈癌的治疗寻找新思路。研究目的探讨AIB1(amplified in breast cancer 1)对宫颈癌放化疗耐受性的影响。研究方法通过慢病毒介导的RNA干扰方法在两种宫颈癌细胞系(Si Ha和Ca Ski)中稳定敲除AIB1,宫颈癌细胞Si Ha-sh AIB1设为实验组,Si Ha-shluc作为对照组。利用线性二次模型曲线(L-Q)曲线进行拟合,计算不同剂量下宫颈癌细胞Si Ha的存活分数(SF),并根据辐射剂量为2Gy时实验组SF2与对照组SF2的比率得出放射增强比(SER);选用Annexin V-FITC/PI染色法检测细胞的凋亡;根据蛋白免疫印迹(western blot)技术评估Cleaved-PARP和Cleaved-Caspase3的表达水平。研究结果在Si Ha细胞中,抑制AIB1表达可引起细胞存活分数(SF)的下降,Si Ha-shluc和Si Ha-sh AIB1的SF2分别为:0.495和0.392,AIB1敲除后放疗增敏比(SER)=1.264;在Si Ha和Ca Ski细胞中,干扰AIB1表达后可引起化疗药物5-FU的IC50值下降(P<0.05);流式细胞术检测得出凋亡细胞百分比和western blot中细胞凋亡相关蛋白Cleaved-PARP和Cleaved-casepase3表达均增加。研究结论AIB1表达减少与宫颈癌放疗后细胞凋亡增加相关,沉默AIB1后可降低化疗药物的IC50值,因此表明AIB1高表达可引起宫颈癌的放射和化学治疗抵抗,靶向AIB1是提高宫颈癌放化疗敏感性的一个潜在目标。