研究背景肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)具有高度的侵袭性和转移性,发病率和死亡率均居高不下,是我国最常见的恶性肿瘤之一。目前最主要的治疗方式为外科手术切除,但由于其早期无明显临床症状,患者感觉不适被确诊时已是肝癌晚期,失去了最佳的手术时机。即使手术治疗后,肝癌患者的预后也是不尽人意,因为肝癌极易复发并发生远处转移。肝癌的发病原因及发病的分子机制尚不完全清楚,目前认为肝癌的发生是一种多因素、多步骤的复杂过程。在我国的主要致病因素为乙型肝炎病毒或丙型肝炎病毒感染,而在发达国家,酒精为主要致病原因;除此之外,还有性激素、黄曲霉素、亚硝胺类物质和微量元素等致病因素。近年来随着放、化疗技术的进步以及分子靶向药物的上市,使得中晚期肝癌患者的生活质量和生存时间得以提高,然而大多数患者不能耐受药物治疗伴随的副作用,同时也可能会导致肝癌产生耐药性,降低药物的治疗效果。因此,积极探索发现新的能够早期预测肝癌的分子标志物,对于提高肝癌的检出率以及肝癌患者的生活质量具有非常重要的意义。细胞周期是各种生物体内细胞增殖的一个必要的过程,它受到细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖性激酶的调控。已有大量的文献报道在多种肿瘤的发生发展中,细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖性激酶起着非常重要的作用。CDK11是丝氨酸/苏氨酸激酶家族的一员,对转录、细胞自噬和细胞凋亡等有着重要的作用,同时在多种肿瘤中高度表达,对其发生发展具有重要的调控作用。然而CDK11在肝癌中的表达水平和作用目前尚未报道,在本篇研究中,我们首先利用TCGA数据库和基因富集分析发现CDK11在肝癌组织中高表达,且和TNM分期正相关,高表达的CDK11预示着较差的生存预后。随后采用免疫组化技术发现CDK11蛋白在肝癌组织中的表达水平也显著高于正常组织,Cox回归分析结果表明CDK11是一个影响肝癌患者预后的独立危险因素,同时具有CDK11高表达的肝癌患者生存预后较差。目的本课题拟利用组织免疫组化技术联合多种网络在线肿瘤数据库,如(TCGA,HPA等),分析在各种人类实体瘤中CDK11的表达情况,并着重分析其在肝癌中的表达水平,对肝癌患者的生存预后是否有预示作用。方法1.借助本课题组搭建的基于TCGA数据库的在线分析网站CAAT分析CDK11在泛癌组织和对应的癌旁组织中的表达情况;2.利用TCGA-LIHC数据集分析CDK11在肝癌中表达情况,并分析其与肝癌患者生存预后的关系;3.使用组织芯片免疫组化实验验证CDK11在肝癌组织和癌旁组织中的蛋白表达情况,与肝癌患者临床特征及生存预后的关系;4.生物学数据统计分析利用R语言、Graph Pad Prism 6.0和SPSS 23.0软件进行。所有数据均以Mean±SD来表示。采用Kaplan-Meier方法绘制CDK11表达与患者预后的生存曲线图并进行log-rank检验。应用Cox风险回归分析方法进行单因素和多因素分析。两组数据间的比较应用两独立样本t检验。α=0.05作为检验水准。结果1.CDK11 m RNA在多种肿瘤中表达均有明显的差异。2.CDK11 m RNA的表达水平在肝癌组织中显著高于癌旁组织,差异具有统计学意义,且高表达的CDK11和TNM分期成正相关关系;K-M生存曲线分析结果表明在肝癌患者中,高表达CDK11的生存时间要比低表达CDK11的患者明显缩短。3.CDK11蛋白的表达水平在肝癌组织中显著升高(P=0.0002),TNM分期Ⅰ-Ⅱ期肝癌患者的CDK11表达水平要比Ⅲ-Ⅳ期患者的低,差异有统计学意义(P=0.0149)。生存预后分析结果显示高表达CDK11的肝癌患者生存时间较CDK11低表达的患者短(HR=1.837,P=0.0005)。单因素分析结果表明CDK11的表达与TNM分期(P=0.003)、肝硬化(P=0.015)呈正相关的关系,而与年龄(P=0.706)、性别(P=0.871)、肿瘤大小(P=0.247)、病理分化程度(P=0.747)无明显的相关关系。Cox单因素和多因素分析结果显示CDK11表达(HR=1.997,P=0.024)及TNM分期(HR=2.514,P=0.003)是肝癌预后的独立危险因素。结论1.CDK11在多肿瘤中表达有差异,肝癌中CDK11表达升高。2.CDK11的高表达预示着肝癌患者的恶性临床特征及更差的生存预后,可能成为一个能够早期诊断肝癌的分子,具有靶向治疗的潜在价值。