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本研究应用显微技术及分子生物学手段从地生兰与其菌根真菌的共生培养体系,研究地生兰与菌根真菌之间的相互作用。从云南省不同地区、不同种类的兰科植物营养根中分离菌根真菌,通过地生兰组培苗的人工接种技术,筛选出与兰花有效共生并能明显促进兰花组培苗生长发育的优良菌株,研究菌根真菌侵入兰花根组织的途径及探讨地生兰与其共生菌根真菌之间的相互关系,揭示菌根真菌与兰花的共生机理,并促使无菌苗菌根化,为解决兰花繁殖的关键问题提供理论依据。为探讨菌根真菌与兰科植物间的相互作用机制,在盆栽和纯培养条件下,用分离获得的真菌菌株分别接种春兰(Cymbidium goeringii Rchb.f.)、虎头兰(C.hookerianum)及齿瓣石斛(Dendrobium devonianum)。通过组培苗人工接种菌根技术,筛选出与兰花有效共生并能明显促进兰苗生长的优良菌株。从生物量增长、显微和超显微结构、重分离原接种菌株及分子生物学等方面获得的证据表明,已成功建立了春兰等组培苗和丝核菌共培养体系;用超薄切片及电子显微镜技术,对春兰营养根消化丝核菌过程和细胞亚显微结构的变化进行了研究,探索利用兰科内生菌根真菌促进地生兰组培苗生长发育的方法,为解决兰科珍贵花卉人工栽培提供理论依据。研究结果表明: 1.春兰、虎头兰和齿瓣石斛的种子在人工培养基上均可诱导发芽并最终形成试管苗,三种种子培养基配方中添加适量的椰乳及购置专门的兰花营养液等,给种子提供了多种必需的营养生长物质和环境条件,有利于种子的正常生长和发育;此外种子的成熟度与在培养基上的萌发时间的长短密切相关,成熟度越高,萌发时间越短,种子苗成活率越高;另还与抑制褐变的活性碳及维生素C 有关。春兰的茎尖组织培养研究筛选出有利于原球茎诱导增殖的培养基为1/2MS +NAA0.5mg/L+6-BA3.0mg/L,增殖率为4;有利于不定芽的分化的培养基1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05mg/L,有利于不定芽的增殖的培养基1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1mg/L;有利于生根的培养基为1/2MS+NAA0.5 mg/L。2.从云南省兰科植物的主要产区的8 个地区11 品种89 株兰科植物的营养根上共分离获得真菌菌株184 个,其中出现频率较高或者文献曾报道为兰科内生菌根真菌的有65 个代表菌株,根据菌落形态、菌丝特征、产孢结构、孢子形态及子实体诱导等大致分为18 类,它们分别隶属于丝核菌属Rhizoctonia sp.、兰科丝核菌类Orchidaceous rhizotonias、毛壳菌属Chaetomium sp.、木霉属Trichoderma sp.、镰刀菌属Fusarium sp.、Diplococcoium sp.、顶枝孢