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HIV嗜性与中国HIV感染者疾病进展关系的研究目的对不同疾病进程、感染途径及亚型的HIV分离株嗜性进行检测，探讨HIV嗜性与中国人群HIV感染及疾病进展的关系。方法1、研究对象研究对象来自河南、吉林、辽宁、新疆、云南，由中国医科大学附属一院艾滋病确认实验室根据《中华人民共和国HIV／AIDS诊断标准》用WB试验确认为阳性。所有标本均在未接受抗病毒治疗以前采集。病例分组：LTNP组（感染时间＞10年，CD4+T细胞＞500个／μ1），HIV组（感染时间＞5年，CD4+T细胞介于200-500个／μl之间，无艾滋病指征性疾病），AIDS组（CD4+T细胞＜200个／μl或出现艾滋病指征性症状）。HIV组265例，AIDS组76例，LTNP组63例。2、标本收集EDTA3K抗凝全血500μl。3、病毒株及细胞系来源实验室毒株SF33由中国CDC参比实验室惠赠；134株HIV由中国医科大学附属一院艾滋病实验室分离。GHOST-CCR5和GHOST-CXCR4细胞系由美国NIH惠赠；MT2细胞系为中国医科大学附属一院艾滋病实验室所有。4、HIV-1病毒株分离采用微量全血法。用密度梯度离心法分离健康人PBMC，以含2.5μg／ml PHA的RPMI-1640预刺激培养72h。将HIV感染者抗凝全血在24孔板上做25μl、50μl、100μl三个梯度稀释，加入PBMC 1×106个／ml进行复孔培养，再加入含有100U／mlIL-2的RPMI-1640至2ml，每3天换液，每7天加入新鲜预刺激72h的健康人PBMC。一周后，每3天测一次p24，直至30天。p24阳性的上清收集冻存于-70℃冰箱中。将分离的病毒株增殖并测定其TCID50。5、TCID50检测提取健康人PBMC，以含2.5μg／ml PHA的RPMI-1640预刺激培养72h。用RPMI-1640（含100U／ml IL-2）重悬，调整浓度为4×106个／ml。96孔板中每孔加入RPMI-1640、PBMC悬液200μl将200μl病毒在板上做4倍系列稀释。第3天换液，第7天测p24。以Spearman-Karber方法计算TCID50。6、病毒嗜性的测定用48孔板周边加PBS，取3排加GHOST-CCR5、GHOST-CXCR4、MT2细胞系，GHOST加5×104个／孔，MT2加2×105个／孔，每孔加分离的病毒培养上清80μl，以SF33做为阳性对照，37℃、5％CO2孵育3小时。每3天换液、消化并测p24抗原，培养并观察细胞病变至15天。7、统计学方法采用SPSS 11.5统计软件进行卡方和方差分析。结果1、体外分离到HIV毒株134例，分离率33.17％。检测HIV嗜性86例，41株M嗜性（47.67％），17株双嗜性（19.77％），28株T嗜性（32.56％）。2、AIDS组T嗜性病毒比例显著高于HIV组和LTNP组（P＜0.05）。HIV组M嗜性病毒比例显著高于AIDS组（P＜0.05）。AIDS组病毒分离率高于HIV组，HIV组病毒分离率高于LTNP组。病毒载量≥10000拷贝／毫升组病毒分离率显著高于1000～10000组，后者HIV病毒分离率显著高于≤1000组（P＜0.05）。3、在吸毒途径感染者中T嗜性病毒比例显著高于经血感染者（P＜0.05）。在经血感染者中M嗜性毒株比例显著高于吸毒途径感染者（P＜0.05）。吸毒途径感染者比血液途径感染者分离率高（P＜0.05）。4、B′／C亚型中HIV感染者T嗜性病毒的比例显著高于B′亚型（P＜0.05）。B′／C亚型HIV感染者病毒分离率高于B′亚型（P＜0.05）。结论1、疾病进展对HIV嗜性和病毒分离率有影响。疾病早期M嗜性病毒比例相对较高。随着疾病的进展，病毒分离率增加，M嗜性病毒减少，T嗜性病毒增加。疾病进展至AIDS期，HIV分离株多为复制较快、毒力较强的T嗜性病毒。2、感染途径可能对HIV嗜性和病毒分离率有影响。吸毒途径感染者多为T嗜性病毒，经血感染者疾病进展至AIDS期仍以M嗜性病毒为主。吸毒途径感染者HIV分离率高于经血感染者。3、我国人群的HIV嗜性和病毒分离率可能与某些亚型有关。B′／C亚型感染者T嗜性分离株较多，且B′／C亚型感染者的病毒分离率较高。