猪附红细胞体（Eperythrozoon suis）可以引起猪附红细胞体病,它主要存在于猪的红细胞表面、血浆以及骨髓内,引起主要症状有黄疸、发热和贫血。对于猪附红细胞体病暂时没有较好的手段控制,而且已知的功能性基因偏少。因此,本试验根据NCBI中公布的猪附红细胞体基因组序列,PCR扩增获得包括全基因在内1561bp的吉林株膜蛋白OxaA基因序列,并上传NCBI（登录号：YP₀04249851.1）。获得的OxaA基因序列与猪附红细胞体基因组KI₃806（登录号：NC₀15153）比较,存在21处同义突变,核苷酸序列同源性为98%,氨基酸序列同源性为100%。利用ExPASy、CPHmodels数据库及TMHMM等方法对OxaA蛋白的结构和理化性质进行了分析。结果显示,OxaA蛋白的理论等电点为9.98,偏碱性；存在多个信号肽可能位点和5个跨膜区域；二级结构以α螺旋、不规则卷曲为主；三级结构有明显的折叠层次； B细胞抗原表位可能存在于20～24位、28～40位、45～53位、142～150位、260～263位氨基酸处；在9-63和122-176氨基酸区间存在两个膜外区片段,暂命名为A和B。针对A和B两段核苷酸序列分别设计引物,连接于原核表达载体pGEX-4T-1上,经IPTG诱导,在大肠杆菌BL-21中表达。SDS聚丙烯酰胺电泳的结果显示两个重组蛋白的大小为33.9kDa和34.6kDa,而免疫印迹的结果说明了两个重组蛋白均能够与猪附红细胞体阳性血清以及GST单抗发生反应,说明了两个重组蛋白的反应原性好。其中A蛋白主要以包涵体形式存在,B蛋白为可溶性蛋白。重组蛋白A和B以GST标签树脂进行了纯化,并且分别建立了间接ELISA方法,对两种方法进行了比较。通过对各条件的筛选,我们确定了重组蛋白B在6.25μg/mL时为最佳包被浓度,3%的脱脂乳的最佳封闭时间为37℃1h；待检血清最佳稀释度为1：100,最佳作用时间37℃1h；辣根过氧化物酶标记的兔抗猪二抗最佳稀释倍数为1：5000,最佳的相互作用时间为37℃1h；底物OPD最佳显色时间为37℃15min。通过与A蛋白的间接ELISA检测比较,B蛋白的敏感性和临床检出率均高于A蛋白,完全可应用于临床检测。本试验为猪附红细胞体病的诊断和防制奠定了基础。