神经干细胞联合胶原蛋白支架移植对大鼠脊髓损伤引起的脑细胞凋亡的影响

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目的:研究神经干细胞联合胶原蛋白支架移植对脊髓损伤(Spinal cord injury,S C I)后大脑神经细胞凋亡的影响。  方法:从孕14天大鼠胚胎大脑皮质提取神经干细胞并在体外培养和鉴定。制作SD大鼠脊髓半切损伤模型45只,将45只SD大鼠随机分为三组:A组(损伤组),B组(神经干细胞移植组)和C组(神经干细胞联合胶原移植组)。1周后再次手术,在B组脊髓损伤部位,注入等量神经干细胞悬液;在C组脊髓损伤部位注入等量神经干细胞结合胶原蛋白悬液;A组不植入任何物质。然后,于细胞移植后1、2、4、6、8周观察运动功能恢复情况;通过染色和测量凋亡蛋白表达观察术后1周,4周和8周后大鼠大脑运动皮质后部组织神经细胞凋亡的情况。  结果:BBB运动评分:细胞移植术后1-3周A组和B组之间的BBB评分无统计学差异;但C组的BBB评分高于A组,且有统计学意义(P<0.05)。细胞移植术后4周,B组和C组的BBB运动评分高于A组,且有统计学意义(P<0.05),而C组的BBB评分与B组无统计学差异。细胞移植术后第8周,B组和C组的BBB运动评分均显著高于A组(P〈0.05);且C组的BBB运动评分高于B组(P<0.05)。苏木精-伊红染色显示A,B,C三组脊髓损伤造模后一周均可见内少量凋亡细胞。细胞移植术后1周,A组内可见较多的凋亡细胞,凋亡细胞数要明显多于B组和C组。另外,B组的凋亡细胞数要略多于C组。细胞移植术后4周,三组中均不见凋亡细胞。凋亡蛋白测定显示,从细胞移植术后4周,B组和C组的bcl-2抗凋亡蛋白均有少量表达;B组可见大量bax阳性细胞,而C组明显低于B组(p〈0.05)。细胞移植术后8周,bax阳性细胞均有降低,而C组少于B组(p〈0.05);bcl-2抗凋亡蛋白,C组仍有少量表达,而B组则基本未见bcl-2阳性细胞。  结论:神经干细胞联合胶原蛋白支架移植可抑制脊髓损伤后大脑神经细胞的凋亡,促进脊髓神经功能的恢复。
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