静脉血栓栓塞性疾病包括深静脉血栓和肺栓塞,严重危害人类生命健康。凝血因子是一类丝氨酸蛋白酶,是抗凝药物的作用靶点。传统抗凝药物肝素和华法林存在出血风险大和使用不便等问题;随着对凝血机制的深入研究,基于新靶点的抗凝药物相继被研发上市,包括活化Ⅱ因子抑制剂达比加群酯和活化Ⅹ因子抑制剂利伐沙班等,但仍存在出血风险大等问题。选择有潜力的靶点开发新型凝血因子抑制剂类抗凝药物,具有十分重要的现实意义。本文总结了现有抗凝药物的临床现状和临床价值,同时总结了凝血机理的研究结果。研究表明,活化Ⅸ因子和活化Ⅺ因子具备较好潜力,是出血风险小的抗凝新靶点。运用计算机辅助分子设计手段,对具有较好成药性的活化Ⅱ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ因子进行了晶体结构分析,得到了各个凝血因子的活性空腔构成等结构特征以及小分子抑制剂的结构特点和作用模式。通过序列比对、进化树分析、晶体结构叠合和活性位点残基比对等手段,考察了四个凝血因子的异同。结果表明,活化Ⅹ因子和活化Ⅸ因子具有高度相似性,小分子抑制剂均以L型构象同靶点结合,主要作用于靶点的S1和S4口袋。同时还分析了活化Ⅹ因子和活化Ⅸ因子的晶体结构差异,以及对小分子抑制剂基团、构象的不同要求。在靶点研究基础上,运用合理药物设计的方法,针对活化Ⅹ因子设计了新化合物,旨在阐明改变酰胺键连接顺序等结构改造对化合物活性的影响,制备了8个邻氨基苯甲酸类化合物,并进行了活性筛选。结果表明,其中3个化合物保持了较好的活性,该结果可用于指导活化Ⅸ因子小分子抑制剂的设计。在靶点分析、小分子抑制剂作用模式比对和活化Ⅹ因子抑制剂改造的基础上,运用合理药物设计方法,针对活化Ⅸ因子设计了取代脯氨酸类新抑制剂。通过计算机分子对接方法进行了虚拟筛选,并分析了化合物同靶点的作用模式。根据筛选结果,结合结构多样性等因素,最终选择合成了15个新型化合物,并制备了活化Ⅸ因子阳性对照药。对合成的新化合物进行了离体酶抑制活性筛选,结果表明,其中4个化合物对活化Ⅸ因子有一定抑制作用。本文所制备的活化Ⅸ因子抑制剂类化合物,结构新颖,采用取代L-脯氨酸作为母核,在保持分子L型构象的同时提供了氢键受体;部分化合物呈现出一定活性,有望作为先导化合物进一步优化。这些研究为后续活化Ⅸ因子抑制剂类抗凝药物的研究提供了一定基础和思路。