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银纳米粒子(silver nanoparticles,AgNPs)具有许多独特的物理化学特性,使其在光学、电子、催化以及医药领域等有着非常广泛的应用。过去的数十年,许多制备技术已经能够控制合成的银纳米粒子的粒径、形状和表面形貌。与传统的物理化学方法相比,生物合成法利用细菌、真菌和植物等合成银纳米粒子,避免有毒化学试剂的使用,具有对环境无污染、成本低等优点,吸引了众多研究者的关注。本文以海洋沉积物样品作为实验对象,通过传统的富集方法结合点种法分离拮抗菌,并筛选出一株拮抗菌,利用其产生的抑菌物质合成银纳米粒子。利用紫外-可见分光光度法(UV-Visible spectrometry,UV-Vis)、扫描电子显微镜(Scanning electron microscopy,SEM)和X射线衍射分析(X-ray diffiraction,XRD)的方法对银纳米粒子进行表征;以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌作为抑菌对象,对银纳米粒子的抑菌性能进行检测。本实验以威海小石岛自然海域(37° 31’2"N 122° 1’19" E)采集的底泥样品作为实验对象,通过富集、稀释涂布平板后,以大肠杆菌(Escherichia coli ATCC 25922)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus ATCC 29213)、鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii ATCC 19606)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus ATCC 17802T)四株病原菌作为指示菌株,以点种法筛选出242株细菌,其中有177株细菌具有抑菌性。基于16SrDNA基因测序对拮抗菌进行鉴定,发现绝大多数菌株属于厚壁菌门。从分离到的拮抗菌中,挑选出一株拮抗性强的细菌DXFD1,经克隆测序得到其完整的16SrDNA序列(1474bp),经比对分析,发现菌株DXFD1与枯草芽孢杆菌枯草亚种(sucillus subtilis subsp.subtilis NCIB 3610T)的 16SrDNA相似性最高(99.59%)。利用菌株DXFD1产生的抗菌物质溶液与AgNO3溶液混合,置于磁力搅拌器上合成银纳米粒子,并对合成的银纳米粒子进行UV-Vis光谱、SEM和XRD表征。结果显示:银纳米粒子多为球形或近球形,粒径分布在30-70 nm,含银纳米粒子的混合液的UV-Vis光谱显示在480 nm处有吸收峰。以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为检测菌株,对银纳米粒子的抑菌性能进行检测。结果表明:银纳米粒子在实验中表现出明显的抑菌效果,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度均为5 μg/L,最小杀菌浓度为10 μg/mL。检测去除表面附着物质的银纳米粒子的抑菌活性,发现抑菌效果降低,结果表明抑菌物质在合成银纳米粒子的过程中结合到粒子表面,提高银纳米粒子的抑菌性能。本文对从威海附近海域、文登盐场、肥城精致盐场样品中分离到的编号为P131T、N62T、X7T、WDS2C4T与JZ3A21五株新菌进行了多相分类学鉴定。菌株P131T分离自威海近海沉积物,为革兰氏阴性菌、好氧、无滑动性、细胞呈杆状。菌株P131T的最适生长温度为28-30℃,最适pH为7.0-7.5,可耐受的盐度最为2.0-3.0%(w/v)NaCl。基于16S rDNA序列的分析表明,菌株P131T属于比齐奥氏菌属,与属内物种的16SrDNA相似性范围为94.6-97.0%。菌株P131T 主要脂肪酸组分为 iso-C15:0、iso-C15:0G、iso-C17:03-OH 和 iso-C171 ω9c。主要的极性脂成分包括磷脂酰乙醇胺、两种氨脂质、氨磷脂、磷脂和其他的脂质。主要呼吸醌类型为MK-6。基因组DNA的G+C含量是36.7mol%。根据遗传学和表型特征证据,菌株P131T(=KCTC42587T=MCCC1H00124T)代表比齐奥氏菌属的一个新物种,命名为沉积物比齐奥氏菌(Bizionia sediminis sp.nov.)。菌株N62T分离自自威海近海沉积物,为革兰氏阴性、兼性厌氧、无运动性和细胞短杆状。2216E固体培养基28℃培养2天,形成圆形、光滑、橘色和直径约为0.6-1.5mm的单菌落。菌株N62T最适生长温度为28-30℃,最适pH为7.0-7.5和最适盐度2.0-3.0%(w/v)NaCl。菌株N62T主要的脂肪酸组分是iso-C15:0、iso-C15:0G、iso-C17:03-OH 和 C17:13-OH。主要的呼吸醌类型是 MK-6。菌株N62T基因组DNA的G+C含量是35.3 mol%。主要的极性脂是磷脂酰乙醇胺、两种氨脂质、糖脂和三种其他的脂质。基于16S rDNA序列的分析表明,菌株N62T属于藏红花黄色线菌科(Crocinitomicaceae),与寒冷微菌属的物种的16SrDNA序列相似性范围为95.8-97.2%。根据遗传学和表型特征证据,菌株N62T(=KCTC 42589T=MCCC1H00117T),代表寒冷微菌属的一个新物种,命名为橙色寒冷微菌(Brumimicrobium aurantiacum sp.nov.)。菌株X7T分离自自威海近海沉积物,细胞革兰氏阴性、无滑动性、兼性厌氧和短杆状。最适生长温度为28-30℃,最适pH为7.0和最适盐度2.0-3.0%(w/v)NaCl。基于16S rDNA序列的分析表明,菌株X7T属于盐坑微菌属,与Salinimicrobium gaetbulicola有着最高的 16SrDNA 序列相似性(96.3%)。主要脂肪酸为 anteiso-Ci5:0、iso-C15:0、anteiso-C17:1cω9c、iso-C17:1ω9c、C17;02-OH 和iso-C17;03-OH。主要极性脂是一种磷脂酰乙醇胺、一种磷脂、两种氨脂质和五种其他未确定的脂质。主要呼吸醌类型是MK-6。基因组DNA的G+C含量是46.7 mol%。遗传学、表型特征以及化学组分结果表明,菌株X7T(=KCTC 42585T=MCCC1H00115T)代表盐坑微菌属的一个新物种,命名为黄色盐坑微菌(Salinimicrobium flavum sp.nov.)。菌株WDS2C4T和JZ3A21分别从文登盐场、肥城精致盐场的样品分离到,细胞为革兰氏阴性、长杆状和无滑动性。生长范围:可耐受盐度1.0-20.0%(w/v)NaCl(最适 6.0-10.0%),温度 20-50℃(最适 37-40℃)和 pH6.5-9.5(最适 7.0-8.0)。菌株WDS2C4T和菌株JZ3A21主要脂肪酸组分均是cyclo-C19;0ω8c、summed features 8(C181 ω7cand/or C18:1 ω6c)、C18:0、C17:0、C16:0 和 11-methyl C18:1 ω7c。菌株WDS2C4T和JZ3A21主要的呼吸醌类型是Q-10。菌株WDS2C4T的基因组DNA的G+C含量为67.7 mol%,菌株JZ3A21的基因组DNA的G+C含量为67.3 mol%。菌株WDS2C4T主要极性脂成分是两种磷脂、氨脂质、磷脂酰甘油、磷脂酰胆碱和两种糖脂。菌株 WDS2C4T与Rhodovulum marinum JCM 13300T 的 16S rDNA 序列相似性最高为 95.11%。与物种 Albidovulum xiamenense、Paracoccus aestuarii、Rhodobacter vinaykumarii 和Roseivivax pacificus 的模式菌株的相似性分别为94.75%、94.00%、93.88%和93.85%。根据16SrDNA序列建立的三个系统发育树(Neighbour-joining,maximum-likelihood 和 maximurn-parsimony)表明,菌株WDS2C4T和JZ3A21位于Rhodobacteraceae科的单独分支上。根据遗传学和表型特征证据,菌株 WDS2C4T(=KCTC 52227T=NBRC 112331T=MCCC 1H00148T)代表红细菌科的一个新属新种,命名为嗜盐白色盐杆菌(Albihalobacter halophilus gen.nov.sp.nov.)。