抗仔猪病毒性腹泻IgY微胶囊的制备及效果评价

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仔猪腹泻是目前严重危害我国养猪业发展的主要疾病,引起仔猪腹泻的病毒源主要是猪传染性胃肠炎病毒(Poorcine transmissibLe gastroenteritis,TGEV)、猪流行性腹泻病毒(Poricine epidemic diarrhoea,PEDV)和轮状病毒(Rotavirus,RV)。通过本实验制备抗仔猪病毒性腹泻的高免全蛋粉和明胶.海藻酸-IgY微胶囊发挥被动免疫作用,对该病进行预防及治疗。   1、采用猪流行性腹泻、传染性胃肠炎、轮状病毒油乳苗(以下简称‘三联苗’)与不同的佐剂混合免疫鸡群的方法。间接ELISA检测结果:佐剂中添加胸腺肽免疫组免疫效果明显优于仅用油佐剂免疫组,其产生的IgY效价高且持续时间长。先用弱毒苗做基础免疫,再用油佐剂苗加强免疫效果明显优于仅用油佐剂苗免疫组。因此,以弱毒苗进行基础免疫,再用胸腺肽油佐剂苗进行加强免疫是制备IgY的最佳方法。   2、利用喷雾干燥技术制备微胶囊及高免全蛋粉,通过对喷雾干燥工艺条件的优化,获得制备微胶囊最佳工艺为:进风温度170℃、进料速度10 mL/min、干燥速度lOs、出口温度70℃;制备高免全蛋粉最佳工艺为:进风温度180℃、进料速度10mL/min、干燥速度5s、出口温度70℃,在上述条件下制备微胶囊及高免全蛋粉,性状最好且IgY活性保持较高水平。   为保护IgY口服时不受酸、碱及胃蛋白酶的破坏,本试验选用天然材料明胶和海藻酸钠作为壁材,按上述筛选喷雾干燥的最佳工艺,研究制各明胶.海藻酸钠-IgY微胶囊的成囊条件。经筛选优化确定微胶囊成囊的最佳条件为:明胶浓度4%,海藻酸钠0.75%,Tween-801%,成囊溶液pH值4.0。以此条件制备微胶囊的包封率为75%,IgY活性保持在80%以上。通过人工胃肠液的体外释放试验表明,微胶囊在人工胃液2h的释放率不超过10%,人工肠液4h的释放率达到超过80%。采用间接ELISA方法和SDS-PAGE电泳对微胶囊中IgY结构和活性进行检测,结果显示,微胶囊通过人工胃液再进入肠液时,释放出的IgY结构不受影响,仍保持完整性且活性保持在80%以上,达到了缓释、控释的目的,保护了IgY经过胃时不受酸、碱及胃蛋白酶的破坏降解,保持较高的生物学活性定点到小肠释放。对微胶囊进行保存期试验,结果发现在12个月内能稳定地保存芯材IgY的活性及蛋白质含量。   3、动物试验结果显示:在早期断奶仔猪的饲料中添加0.5%的高免全蛋粉可以有效降低仔猪腹泻率、减小腹泻频率。提高日增重和料肉比,促进仔猪的生长。
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