聚合血红蛋白的聚合工艺研究

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聚合血红蛋白是一类被广泛研究的红细胞代用品。其采用的血红蛋白主要为人过期血和动物血,这些血源也存在着很多问题。为解决这些问题,我们率先采用人脐带血作为原料从事红细胞代用品的研究。纯化人脐带血血红蛋白(PHb)易解聚为二聚体,被肾代谢掉,同时含有很高的氧亲和力,不能有效地向组织供氧。为了提高脐带血血红蛋白的稳定性和降低其氧亲合能力,首次采用双(3,5-二溴水杨基)延胡索酸酯(DBBF)修饰脱氧血红蛋白生成DBBF-αPHb,通过讨论影响反应的因素优化了反应工艺,得到了合适的反应条件。通过检测,得知血红蛋白的稳定性增加,氧亲和性降低,DBBF-αPHb具有很好的携氧和送氧能力,同时DBBF-αPHb保持了很好的生物活性。DBBF-αPHb为开发以血红蛋白为基础的红细胞代用品提供了有利条件。我们进一步对戊二醛分子间交联DBBF-αPHb溶液做了初步探讨。戊二醛是常用的交联剂,但其活性过高、无特异性位点的特性导致其聚合产物平均分子量大、分子量分布宽。为了克服这些缺点,本文对均相反应中的一些影响因素如:pH值和GDA加入方式等进行了研究。此外,建立了一种原创的基于置换色谱的非均相聚合方法——阳离子交换色谱柱上聚合反应。该方法利用阳离子交换剂对修饰度(聚合度)小的血红蛋白吸附能力大的原理,使其在柱上富积,同时加入戊二醛进行聚合反应。结果表明该方法能比较有效地缩小聚合血红蛋白的分子量分布。
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