薄荷属植物的组织培养与快速繁殖技术研究

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通过对外植体选择、消毒时间、消毒方法、琼脂和蔗糖浓度、温度、光照条件的筛选及继代增殖和生根过程中激素种类和浓度的研究,确定了薄荷属(Mentha L.)植物薄荷(M.haplocalyx Briq.)、留兰香(M.spicata L.)和椒样薄荷(M.piperila L.)组织培养各阶段的最佳条件,分别建立了它们的组培快繁技术体系。1.薄荷属植物组织培养的基本条件研究通过对3种植物组织培养条件的筛选,确定了薄荷属植物组织培养的基本条件:最佳外植体为茎尖;最适的外植体消毒处理为先用75%酒精处理30s,再用0.1%HgCl2处理10min或0.2%HgCl2处理8min;培养材料的接种方式为斜插;培养条件为光照强度2000~3000luX,光照时间12h/d左右,温度(25±1)℃;基本培养基类型为MS;激素种类为6-BA和NAA;薄荷和椒样薄荷的最适激素浓度为2.0mg/L左右6-BA和0.3mg/L左右NAA,留兰香最适激素浓度为低于1.0mg/L6-BA和低于0.1mg/LNAA。2.薄荷组织培养条件优化与快繁体系建立通过对影响薄荷初代培养污染率、不定芽诱导、组培苗生根率以及玻璃化率等因素的研究表明,外植体长度以0.2~0.5cm为宜,初代培养的最佳条件为附加30g/L蔗糖、6g/L琼脂、1.0mg/L6-BA和0.2mg/LNAA的MS培养基,不定芽诱导的最佳条件为添加40g/L蔗糖、7.0g/L琼脂、2.5mg/L6-BA和0.2mg/L NAA的MS培养基,生根诱导的最佳条件为附加35g/L蔗糖、6.5g/L琼脂、0.5mg/L 6-BA和0.2mg/L NAA的1/2MS培养基。继代培养时以MS为基本培养基,在蔗糖浓度40g/L、琼脂浓度7g/L、6-BA浓度2.0mg/L、0.2mg/L NAA以及培养温度25℃和光照时间12 h/d的条件下进行,可以降低试管苗的玻璃化率。3.留兰香组织培养条件优化与快繁体系建立通过对留兰香组织培养和快速繁殖最佳条件培养的研究表明,初代培养的最佳条件为MS基本培养基,继代(增殖)培养的最佳条件为添加40g/L蔗糖、7g/L琼脂、0.2mg/L 6-BA和0.02mg/L NAA的MS培养基,瓶外生根的方法为直接选用继代增殖中生长健壮、高3~5cm的培养苗,用含25mg/L 6-BA和50mg/L NAA的溶液浸泡下端1h,栽入填有珍珠岩和腐殖土(1∶1)的营养钵内培养,生根后移栽至大田。4.椒样薄荷组织培养条件优化与快繁体系建立通过对椒样薄荷组织培养最佳条件和组培苗生根的研究表明,初代培养的最佳条件为添加30g/L蔗糖、6.5g/L琼脂、0.5mg/L 6-BA和0.1mg/L NAA的MS培养基,不定芽诱导的最佳条件为添加35g/L蔗糖、6.5g/L琼脂、1.0mg/L 6-BA和0.2mg/LNAA的MS培养基;继代(增殖)培养的最适激素组合为1.5mg/L6-BA+0.2mg/LNAA;生根诱导的瓶内培养最佳条件为附加0.5mg/L 6-BA和0.3mg/L NAA的1/2MS培养基,瓶外培养最佳条件为100mg/L 6-BA和50mg/L NAA溶液浸泡培养苗下端30min或50mg/L 6-BA和25mg/LNAA溶液浸泡处理60min。5.组培苗与根蘖苗生物学性状和经济学性状的比较分析在相同的栽培条件下,比较分析组培苗与根蘖苗生物学性状与经济学性状的差异,结果显示薄荷、留兰香和椒样薄荷组培苗的株高、有效分枝数、主茎存叶对数、主茎叶面积、鲜草产量、出油率、产油量、薄荷脑含量比相应的根蘖苗有所提高,表明组织培养是薄荷属植物生产中提高产量和质量的良好的技术手段。
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