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目的研究和提高益心宁神片的质量标准。探讨益心宁神片对睡眠剥夺对大鼠海马区神经细胞的影响，并研究其作用机制。方法采用薄层色谱法对益心宁神片中人参茎叶总皂苷，五味子，灵芝三位药材进行定性鉴别。并采用高效液相色谱方法测定益心宁神片中五味子醇甲和五味子乙素的含量。药效学方面采用多平台水环境法制作大鼠睡眠剥夺模型，用常规HE染色，尼氏（Nissl）染色，光镜下观察神经细胞的形态，进行免疫组化染色，应用图像分析软件IPP进行图像分析，对所得数据进行统计。采用透射电镜观察海马CA3区神经细胞超微结构的改变。结果薄层色谱法的斑点清晰，阴性对照无干扰。五味子醇甲和五味子乙素的进样量在0.5~20μg范围内，峰面积和进样量呈良好的线性关系。回归方程分别为： Y=1.103×106X-1.997×10~2,(r=1.0000);Y=2.636×10~6X+2.481×10~4,(r=0.9999)。五味子醇甲平均含量的RSD为1.6448%；五味子乙素平均含量的RSD为2.2024%。光镜下可见神经细胞结构变化上给药组明显小于模型组并且与空白组差异不大，且正常细胞率也显示该结果。免疫组化结果显示，与模型组相比，给药组的5-HT表达显著降低，BDNF的表达显著升高。透射电镜下，睡眠剥夺会导致大鼠海马CA3区神经元细胞的固缩，细胞核深染，细胞内的线粒体结构肿胀、变形，线粒体嵴模糊、紊乱，内质网扩张、腔隙明显。结论研究显示采用薄层色谱法对益心宁神片进行质量控制方法简单，可靠。采用反相高效液相色谱法同时测定益心宁神片中五味子醇甲和五味子乙素的含量，方法灵敏度高，方法简单，结果准确。光镜下可见益心宁神片对由于睡眠剥夺引起的大鼠海马CA3区神经元细胞的损伤有保护作用，可能与其保护细胞形态结构的正常性，降低5-HT的表达，促进BDNF的释放有关。电镜观察益心宁神片组的神经细胞及细胞内超微结构的损害明显小于睡眠剥夺组，提示睡眠剥夺会引起大鼠海马CA3区神经细胞超微结构发生病理性改变，益心宁神片对睡眠剥夺引起的大鼠海马CA3区神经细胞超微结构损害具有明显的治疗作用。