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轮状病毒(Rotavirus,RV)是引起全世界婴幼儿和幼龄动物严重腹泻的最重要、最常见的病原。在发展中国家,每年因RV 感染发生中度和严重腹泻以及死亡的儿童高达1887 万人;在发达国家,因RV 感染造成的经济损失是一个不容忽视的问题。据估计美国每年就此一项的医药损失高达2 亿6 千万美元。鉴于RV 危害严重且无有效的治疗手段,世界卫生组织(WHO)将RV 疫苗列为最优先发展的疫苗项目之一。目前正在研制的候选RV 疫苗包括重组或减毒疫苗、灭活疫苗、病毒样颗粒(VLPs)疫苗、亚单位疫苗、DNA疫苗和转基因植物疫苗等,动物实验表明这些疫苗的免疫保护效果差异较大,因此对于新型RV 疫苗的研究仍在探索之中。A 组RV 血清型众多,疫苗研究实践表明,包含中和性抗原的多价疫苗的效果要好于单价疫苗。为了探索以非复制型腺病毒为表达载体的多价RV 基因工程疫苗的可行性,我们在前期获得了表达我国A 组RV G1 型、G2 型和G3 型流行毒株VP7 基因的非复制型重组腺病毒rvAdG1VP7、rvAdG2VP7 和rvAdG3VP7,并对其免疫效果进行了研究,均获得了良好的免疫效果。RV VP6 蛋白是其主要的组特异性抗原,有较强的抗原性和免疫原性,可诱导保护性免疫。研究表明,VP6 蛋白的IgA 单克隆抗体对RV 感染具有免疫保护作用,肌注免疫VP6 DNA疫苗可产生较好的异源保护作用,以VP6 蛋白和黏膜佐剂免疫小鼠可诱导产生对鼠RV EDIM 株的完全保护作用。为了获得更有效的RV基因工程疫苗,我们在前期构建了表达我国A 组RV VP6 基因的非复制型重组腺病毒rvAdVP6。本论文在上述工作的基础上,对轮状病毒重组腺病毒疫苗rvAdVP6 的免疫效果进行了研究。获得了以下结果: 1.将非复制型重组腺病毒疫苗rvAdVP6 经滴鼻和灌胃两种途径免疫Balb/c 小鼠两次,对免疫后小鼠的血清IgG抗体水平和相关的细胞因子水平进行了检测。结果表明,用rvAdVP6经滴鼻和灌胃两种途径免疫Balb/c小鼠后均可诱导机体产生较强的RV特异性全面免疫应答,包括体液免疫和细胞免疫,但主导免疫反应与免疫途径有关。与相应的对照组相比,灌胃免疫组小鼠产生的IL-4 水平明显高于滴鼻组,而滴鼻免疫组小鼠产生的IFN-? 水平明显高于灌胃组,由此可推测rvAdVP6 滴鼻免疫组小鼠可能产生以Th1型免疫反应为主的全面免疫应答,而rvAdVP6 灌胃免疫组小鼠可能产生以Th2 型免疫