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目的：通过观察不同浓度剂量的降糖三黄片对IL-1β诱导的原代大鼠胰岛细胞凋亡的影响,探讨降糖三黄片对死亡受体Fas/FasL的作用途径,探索降糖三黄片治疗和改善胰岛细胞损伤和凋亡的作用机制。方法：使用胆总管逆行灌注、胶原酶V原位消化及Ficoll梯度离心方法从正常SD大鼠胰腺分离纯化获得原代胰岛细胞；IL-β作用胰岛细胞24h后,使用MTT法选择对胰岛细胞具有保护作用的降糖三黄片有效药物浓度；RT-PCR法检测降糖三黄片对IL-1β诱导下细胞内FasmRNA、BaxmRNA、Bcl-2mRNA表达的影响；Western Blot法检测降糖三黄片对IL-1β干预后细胞内Fasl、Cyto-c、capase-3蛋白表达的影响。结果：1.本实验中使用胆总管逆行灌注、胶原酶V原位消化及Ficoll梯度离心方法从正常SD大鼠胰腺分离纯化获得胰岛细胞,并选用11.lmmol/L葡萄糖浓来度培养细胞。通过测量胰岛素释放量,可制备出细胞形态及功能良好的原代大鼠胰岛细胞。2.IL-1β作用于胰岛细胞24h后,采用MTT法选择对胰岛细胞具有保护作用的降糖三黄片有效药物浓度,遴选出低(50μg/ml)、中(100μg/ml)、高(200μg/ml)三组剂量。3.IL-1β与胰岛细胞和共同培养24h后RT-PCR检测发现与空白对组相比IL-1β刺激下胰岛细胞中FasmRNA及BaxmRNA的表达升高、Bcl-2mRNA的表达降低(P<0.05)。提前予药物干预后24h后中、高剂量降糖三黄片组、吡格列酮组胰岛细胞中FasmRNA表达下降(P<0.05),低剂量降糖三黄片组胰岛细胞中FasmRNA未见明显下降(P>0.05),其中高剂量降糖三黄片组效果优于吡咯列酮组(P<0.05),中剂量降糖三黄片组效果不如吡咯列酮组(P<0.05))；药物干预24h后发现高、中剂量降糖三黄片组、吡格列酮组可以减少IL-1β刺激下胰岛细胞中BaxmRNA的表达(P<0.05)且这三组之间两两比较未见明显统计学差异(P>0.05),低剂量降糖三黄片组未见明显减少(P>0.05)；药物干预后24h后,降糖三黄片中、高剂量组、吡格列酮组可以增加胰岛细胞中Bcl-2mRNA的表达(P<0.05),低剂量降糖三黄片组未见明显增加(P>0.05),其中高剂量降糖三黄片效果优于吡咯列酮组(P<0.05),中剂量降糖三黄片组效果与吡咯列酮组相比未有明显统计学差异(P>0.05)。4.IL-1β刺激24h后,Western Blot法检测出胰岛细胞中FasL、Cyto-c、caspase-3蛋白表达明显增加,予药物干预后显示高剂量组降糖三黄片组、吡咯列酮组、中剂量降糖三黄片组可减少细胞中fasl蛋白、cyto-c蛋白、caspase-3蛋白的表达,而低剂量降糖三黄片组胰岛细胞中fasl、cyto-c、caspase-3蛋白表达未见明显下降。结论：降糖三黄片可通过抑制Fas/Fasl表达,下调Bax、上调Bcl-2表达,抑制Cyto-C释放,减少caspase-3的表达来保护大鼠的胰岛细胞。