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胎粪吸入性肺炎是新生儿的常见病，是窒息足月儿、尤其是过期产儿的主要死因之一，重者出现的急性肺损伤(acute lung injury，ALI)类似ARDS的病理过程。上世纪末，外源性表面活性物质(Surfactant，Surf)替代或灌洗、一氧化氮吸入(inhaled nitric oxide，iNO)疗法的应用，对胎粪肺炎并发肺高压的治疗带来很大进展，临床疗效显著，使许多重症肺高压患者避免了体外膜肺(ECMO)的应用。但是，由于胎粪成分复杂，导致胎粪性ALI的病理生理变化复杂多样，故仍给临床治疗带来一定困难。研究表明肺中性粒细胞聚集、内源性肺表面活性物质失活及功能丧失、氧化-抗氧化失衡在ALI发病过程中起重要作用，其中，过氧亚硝酸盐(ONOO~-)可使Surf等关键蛋白硝基化而失活，参与多种原因诱导ALI的发病机制，硝基酪氨酸是反映体内ONOO~-含量的敏感、可靠指标，也是近年来的研究热点。关于前二者在胎粪诱导ALI中的作用已有较多文献报道。体外研究表明，胎粪具有直接刺激PMN“呼吸爆发”，产生大量氧自由基的作用，但关于胎粪诱导ALI的过氧化损伤机制及抗氧化剂干预作用尚缺乏研究。 超氧化物歧化酶(SOD)是经典的抗氧化剂。重组人超氧化物歧化酶(rhSOD)气管内给药具有吸收快、半衰期相对较长、新生儿用药安全等特点，已有研究表明rhSOD可预防或减轻高氧或内毒素诱导的肺损伤，预防早产儿慢性肺疾病(chronic lung disease，CLD)的发生，增强iNO降低肺动脉压和改善氧合的作用。但至今，在国内外尚未见有rhSOD治疗胎粪肺损伤的报道。NO作为一种活性小分子，它的作用不仅仅局限于选择性扩张肺血管，它还有一定的抗炎作用，同时，还有潜在的过氧化损伤作用。因此，对于rhSOD早期干预能否减轻胎粪诱导ALI、干预时的合理剂量及其联合iNO的疗效是值得我们研究的课题。脚江大李褥份学世触丈 目前对rhSOD和Surf的药物相互作用研究较少，根据已有资料表明，rhSOD和Surf混合后没有改变rhSOD的活性，rhSOD对Surf活性的抑制作用很小，并随Surf磷脂浓度增加而消失，而且Surf可作为药物载体使其它药物气道内滴入后获得更为均匀的肺内分布，加快药物被上皮细胞吸收，延长气道内滴入的rhSOD蛋白清除时间。Wal七her等报道SoD一Surf脂质体气道内应用可减轻高氧诱导的早产兔肺损伤，但未见有关rhSOD联合Surf治疗胎粪诱导ALI的报道。 为此，本研究选用胎粪诱导幼鼠ALI模型，以单剂不同剂量rhSOD(5，10或20mg/kg)、联合20mg/kg rhSOD与20ppm NO吸入、或联合20mg/kg rhSOD与50 mg/kgSurf早期气管内给药干预，观察24h后肺内炎症指标、过氧化损伤指标、硝基酪氨酸形成的变化，以探讨它们在胎粪诱导ALI中的作用，旨在为临床该病及其并发症 的治疗和预防提供新的策略和思路。 第一部分rhSOD对胎粪诱导幼鼠急性肺损伤的抗炎及抗氧化作用研究目的: 探讨不同剂量(5，10或20mg/kg)rhSOD对实验性胎粪诱导ALI的炎症及过氧化损伤的影响。方法:1.动物及分组健康雄性幼年SD大鼠48只，体重130一1709，随机分为6组，每 组各8只，气管切开插管，经气道分别注入生理盐水、20%胎粪生理盐水混悬液或 rhSOD，具体分组如下: (1)正常对照组(normal，N):lml/kg一生理盐水 (2)胎粪模型组(meeonium，Mee):lml/kg胎粪 (3)胎粪+生理盐水对照组(Mee/saline):(2)+lml/kg生理盐水 (4)胎粪+rhSOD smg/kg组(Mee/rhSOD 5 mg/kg):(2)+5 mg/ml/kg rhSOD (5)胎粪+r hSOD10mg/kg组(Mee/rhSOD 10mg/kg):(2)+10mg/m1/kg rhSOD (6)胎粪+rhSOD 20mg/kg组(Mee/rhSOD 20 mg/kg):(2)+20mg/ml/kg rhSOD2.所有动物均在术后1一1.5h拔管，缝合气管、颈部肌肉和皮肤，等动物清醒后允 许正常活动和饮食。24h后处死，分别行大鼠支气管肺泡灌洗液(BAL)细胞计数 和蛋白含量、肺通透指数(BAL蛋白含量/血浆蛋白含量，pulmonary permibility index，PPI)、乳酸脱氢酶(LDH)含量测定，行肺匀浆髓过氧化物酶(MPO)、超葫左丈李博毖学夕触戈 氧化物歧化酶(，S OD)活性和丙二醛(MnA)、8一异前列腺烷(8一1 soprostane) 含量测定，观察光镜下动物肺损伤的程度并进行肺损伤病理评分。结果1.胎粪诱导肺损伤时各指标的变化 与N组比较，Me。组BAL细胞计数、蛋白含量、PPI、LDH及肺组织MPO活性、 MDA含量均显著增高(P均<0 .01)，肺组织SOD活性无显著变化(尸>0 .05);光 镜观察发现，N组大鼠肺组织HE染色可见肺泡结构完整，肺泡壁无水肿，肺实质 无明显炎症细胞浸润;Mec组大鼠可见肺泡壁明显水肿、增厚，肺实质明显实变， 大量炎症细胞浸润，不同程度局灶性肺出血、肺水肿，肺泡腔有大量渗出物，包 括各种白细胞、血浆、纤维素，肺损伤病理评分明显高于N组，差异有显著性 (只0.01)。MeC与Mee/saline组之间比较，上述指标差异均无显著性(P均 >0 .05)。2.rhSOD对胎粪诱导肺损伤的影响(1)肺泡一毛细血管屏障通透性的变化:与Mec/saline比较，rhSOD各治疗组BAL蛋 白含量、PP工的变化不明显，差异均?