细菌AHLs信号分子磁性荧光探针构建及应用

来源 :渤海大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liuguoqiangswu
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食品的腐败变质主要是由于微生物作用引起的,微生物的生长及生物学功能的表达受其群体感应系统所调控,其中,N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)是革兰氏阴性菌中一种典型的群体感应信号分子。因此,建立一种对群体感应信号分子AHLs具有高灵敏度和特异性识别的检测方法具有重要意义。本文以碳量子点为荧光转换信号,N-Z-L-HSL作为模板分子,包裹二氧化硅的四氧化三铁为支撑材料,采用表面分子印迹技术,构建AHLs信号分子磁性荧光探针。通过透射电子显微镜(TEM)、红外光谱(FI-IR)、X射线粉末衍射(XRD)、热重分析(TGA)和振动样品磁强计(VSM)技术手段对其形貌、结构和磁性能进行了表征。吸附特性研究结果表明,所制备的印迹聚合物对目标物具有较好的吸附效果,吸附容量为4.9 mg/g,拟二级动力学和Freundlich吸附等温模型更适合描述该吸附过程。基于分子印迹磁性荧光探针建立了细菌群体感应系统中AHLs信号分子磁性碳量子点荧光检测方法。在目标物浓度为0.625-30μg/L的范围内,磁性荧光探针与N-Z-L-HSL及其六种类似物均呈现较好而线性关系。将其用于实际样品检测,在5、10、20μg/L的添加水平下,样品的添加回收率均在83.1%-92.68%之间,相对标准偏差低于5.09%。结果表明,该方法能够满足实际样品中AHLs检测的需求。通过结晶紫染色法和TTC试验研究磁性荧光探针对铜绿假单胞菌生物被膜的影响。分别考察了在聚合物添加量,培养温度和培养时间的不同的条件下,聚合物对生物被膜形成的影响。结果表明,所制备的分子印迹聚合物对生物被膜的形成有一定的抑制作用,随着聚合物添加量的增多,细菌的生物被膜量呈现下降的趋势,在添加量大于15 mg后,生物被膜量趋于平缓;相比于培养温度为25℃和30℃,在培养温度为37℃时,聚合物对生物被膜的抑制效果最优;在0-30 h内,与对照组相比,聚合物的添加对铜绿假单胞菌生物被膜的形成均有一定的抑制作用。除此之外,分子印迹聚合物对铜绿假单胞菌的生长还存在一定的抑制作用。
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