卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)隶属于鲹科(Carangidae)、鲳鲹属(Trachinotus),是一种广盐性鱼类,具有生长速度快、营养价值高、食性简单、容易饲养等优点,已成为我国东南沿海地区重要的海水养殖品种之一。目前卵形鲳鲹的养殖方式多采用高密度网箱养殖。高养殖密度会使鱼类长期处于应激胁迫之中,从而影响到鱼类生长和福利水平,增大养殖管理风险。本文通过研究不同养殖密度对卵形鲳鲹幼鱼的生长和生理生化的影响,以期为卵形鲳鲹的健康养殖和提高鱼类福利水平提供一些参考。本研究以卵形鲳鲹为研究对象,首先将实验鱼(9.75±0.11 g)随机分为三个密度组,每个密度设置3个重复,网箱(1m×1m×1m)放养量分别为100尾、200尾和300尾,分别标记为低密度组、中密度组和高密度组,实验持续10周。实验结果如下:(1)实验结果表明,在中和高密度组中卵形鲳鲹的生长性能显著下降,饲料系数显著升高(P<0.05)。各组之间的特定生长率差异不显著(P>0.05)。肥满度随着密度的增加而降低,在低密度组中显著最高(P<0.05)。血清皮质醇水平在各组之间无显著性差异(P>0.05);低和中密度组的血清甲状腺素水平显著高于高密度组(P<0.05)。血清葡萄糖浓度在中和高密度组中显著增加(P<0.05);血清总蛋白、总甘油三酯和总胆固醇浓度在高密度组中显著降低(P<0.05)。肌肉成分检测结果表明,粗脂肪含量在低密度组中显著最高(P<0.05),而水分、灰分和粗蛋白质含量在各组之间无显著性差异(P>0.05)。在该实验中,超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和总抗氧化剂能力随着密度的增加而增加。血清溶菌酶、C3和C4含量在高密度组中显著增加(P<0.05)。q RT-PCR结果显示,随着密度的增加,HSP70在肝、肾和脑中的表达水平显著上调(P<0.05),但在脾脏中的表达无显著性差异(P>0.05)。总体而言,较高养殖密度对卵形鲳鲹幼鱼的生长、饲料系数和生理生化产生负面影响;这意味着养殖成本将增加,不利于经济效益,同时也降低了卵形鲳鲹福利水平。(2)作为应激蛋白和重要的分子伴侣,热休克蛋白90近年在水产养殖研究中受到了相当大的关注,其在生物耐受各种逆境应激源方面起着重要的生物学作用。在本文中,首次获得了卵形鲳鲹To GRP94、To HSP90α和To HSP90β的c DNA序列。To GRP94 c DNA(Gen Bank登录号:MT120311)序列长度为2711个碱基对(bp),其中开放阅读框含有2394bp,可编码797氨基酸的多肽。To GRP94氨基酸序列在N-末端存在一个信号肽序列,一个HSP90蛋白家族信号Yk NKEIFLRE和五个HSP90家族的保守信号区以及一个内质网靶向序列KDEL。To HSP90αc DNA(Gen Bank登录号:MT120312)序列长2429bp,其ORF含有2190bp,预测其可编码730氨基酸。To HSP90α氨基酸序列中存在一个HSP90蛋白家族信号Ys NKEIFLRE和五个HSP90家族的保守信号区。To HSP90β(Gen Bank登录号:MN641479)序列长2648bp,其中ORF序列长2184 bp,可编码一个含728氨基酸的蛋白。To HSP90β氨基酸序列中存在一个HSP90蛋白家族信号基序Ys NKEIFLRE和五个HSP90家族的保守信号区。通过序列比对和系统发育分析,表明这三个基因的氨基酸序列与其他鱼类已知的相应氨基酸序列具有高度同一性,分别属于HSP90家族中的GRP94、HSP90α和HSP90β亚家族。通过q RT-PCR检测,三个基因在被检测的九个组织中均有表达。To GRP94在鳃组织中的表达量最高,其次是鳍条、肾脏和肝脏组织,其他组织的表达相对低些;To HSP90α在血液中的表达量最高,其次是脑、肾脏和鳃组织;To HSP90β在肠中的相对表达水平最高,其次是肾脏、鳃、鳍条和肝脏组织。这三种基因在各组织中均有表达,暗示着这三个基因具有多种生物学功能。在密度慢性胁迫下,三种基因在相应的组织中都有不同程度的上调。脑和肌肉中To GRP94在高密度组中表达量显著上调(P<0.05),而在肾脏中的表达量在各组之间差异不显著(P>0.05)。随着密度的增加,肝脏、肾脏和肌肉中的To HSP90α表达水平上调,在高密度组的表达量显著高于低密度和中密度组(P<0.05),而脑组织中的To HSP90α在各组之间的表达水平无统计学意义(P>0.05);同样,随着密度的增加,To HSP90β在肾脏和脑中的相对表达水平显著上调(P<0.05),在高密度组中表达最高;肌肉中To HSP90βm RNA在高密度组中的相对表达水平显著最高(P<0.05),而在中密度组表达量最低。这三种基因与密度胁迫密切相关,高密度可能对实验鱼产生了慢性拥挤胁迫。