论文部分内容阅读
他克莫司(tacrolimus,FK506,商品名Prograf)属于大环内酯类免疫抑制剂。最早由日本藤泽药品工业公司探索研究所于1984年自日本筑波山土壤中分离的筑波链霉菌(Streptomyces tssukibaensis)NO9993的发酵液中提取,并于1993年正式上市。其药效是环孢素A的50～100倍,临床上可有效预防各种器官移植后急性排斥反应的发生,并能逆转难治性排斥,市场应用前景广阔。国内企业在成功研制其原料药的基础上,陆续研制成功其胶囊剂与软膏剂。目前,他克莫司及其制剂尚未被国内外权威药典收载。为确保临床用药安全有效,我们对他克莫司原料及其胶囊剂、软膏剂进行了全面的质量研究。目的:建立他克莫司及其胶囊剂、软膏剂的质量控制方法。方法:采用液相色谱等现代及传统分析技术对他克莫司及其胶囊剂、软膏剂进行质量研究,重点考察他克莫司原料药的互变异构现象和含量测定,胶囊剂的溶出度和含量均匀度,软膏剂的提取方法等。采用十八烷基硅烷键合硅胶柱(Shim-packVP-ODS柱,150mm×4.6mm,5μm),检测波长为210nm,流动相为异丙醇-乙腈-磷酸溶液(pH值为3.5)(35:2:63),流速为1ml/min,柱温为50℃。结果:他克莫司在水溶液中有互变异构现象。以流动相为溶剂,常温条件下,6小时左右他克莫司与异构体Ⅰ、Ⅱ达到互变平衡;以28%乙腈为溶剂、70℃水浴处理10分钟,室温放置约2小时,他克莫司与异构体Ⅰ、Ⅱ即达到互变平衡;当进样体积为50μl时,浓度在4.56～456μg/ml范围,他克莫司峰面积与浓度呈良好线性关系,相关系数为1.0000,n=7;胶囊剂照溶出度测定法(中国药典2005年版二部附录X C第三法),以100ml水为溶出介质,转速为每分钟50转,依法操作,分别在5、10、20、30、45、60分钟取样,测定溶出均一性,结果仿制品与原研药溶出性能一致,溶出性良好;软膏剂以28%乙腈为溶剂、70℃水浴提取10分钟,冰浴10分钟,滤膜(0.45μm)过滤,续滤液室温放置1.5小时,取100μl进样测定,结果辅料对他克莫司含量测定无干扰,他克莫司与相邻峰之间的分离度良好。回收率平均值为100.2%,相对标准偏差为1.5%(n=9)。结论:上述方法简便实用、准确、重现性好,适用于产品的质量控制。