单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具,在基因和蛋白质的结构和功能研究方面有着不可或缺的作用。本文主要是选取脂多糖(LPS)和淀粉样前体蛋白(C99)两种物质作为免疫原对Balb/c小鼠进行定期免疫,利用经典的杂交瘤技术,建立了稳定分泌特异性单抗的杂交瘤细胞株。对所得到的杂交瘤细胞株进行扩大培养,纯化得到单克隆抗体,并将单抗应用于疾病模型细胞等相关领域的研究中,为疾病的防治研究提供实验用原材料,也可能用于研究疾病的诊断和预防。在动物效价达到一个稳定的水平后,通过ELISA方法分别选择出一只效价最好的动物进行细胞融合实验,种入96孔细胞培养板进行细胞培养。培养一段时间后进行阳性杂交细胞株的筛选工作,其中LPS得到10株阳性细胞株,C99得到8株阳性细胞株,同时通过二次筛选判断是否有假阳性细胞株。接下来各选择效价最好的3株阳性细胞株进行亚克隆实验,反复实验直至得到单克隆阳性细胞株,其中LPS免疫原得到3株单克隆细胞株,编号依次是1B9-H7-H6、5C12-A12-C8和5F6-G8-B11,而C99免疫原得到2株单克隆细胞株,编号依次是1H5-A10-H7和3H2-A9-D9。在得到针对LPS和C99的单克隆细胞株之后,将细胞转入细胞培养瓶进行扩大规模的细胞培养,或者可以采集相应的细胞进行小鼠腹水的制备,通过这两种手段来实现单克隆抗体的批量生产。最后,通过小鼠单克隆抗体亚类测定试剂盒对所得到的单抗进行鉴定,得到所得到的抗体亚类为IgG2A、IgG2B和IgM。