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城市生活污水中的雌激素结合态有硫酸盐和葡萄糖醛酸盐结合态两种形式,而硫酸盐和葡萄糖醛酸盐结合态可以分别被污水中的芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶降解。因此,在研究雌激素或者雌激素结合态时,必须保证结合态样品保存时不发生分解。本研究是通过抑制污水中芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的活性来阻止结合态的分解,从而保证结合态样品的完整性。本研究首先选取了几种常见的抑制剂、高p H和低p H对芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶进行酶学抑制实验,结果发现两种酶对1m M Hg Cl2、1m M EDTA和9.5%甲醇有很强的抵抗能力,不能阻止结合态的分解。低p H(p H=1)虽然可以完全抑制两种酶的活性,但是研究发现硫酸盐结合态在低p H下会进行分解。高p H(p H=11)既可以完全抑制芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的活性,也不会对两种结合态的样品产生分解作用。最后,用破碎后的污泥样品进行验证,结果表明污泥中的结合态在p H=11的条件下未发生降解作用。因此,通过将污水样品p H调节到11是一种有效保存样品中雌激素硫酸盐和葡萄糖醛酸盐结合态的方法。本研究还对不同浓度Hg Cl2下芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的活性进行实验,通过剂量-反应曲线,可以发现浓度为2 g/L的Hg Cl2对两种酶均有良好的抑制作用。再取活性污泥进行稀释并向其中加入一定浓度的雌激素硫酸盐结合态和葡萄糖醛酸盐结合态,分别在室温、4℃、p H=1、p H=11、2 g/L Hg Cl2几种条件下进行保存,最终结果显示只有在污泥中加入浓度为2 g/L Hg Cl2条件下,雌激素结合态才未发生分解。因此,向污水中加入浓度为2 g/L Hg Cl2是也一种有效保存样品中雌激素硫酸盐和葡萄糖醛酸盐结合态的方法。芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶是人体中广泛存在的两种水解酶,与人体健康紧密相关。研究发现,乳腺癌、卵巢癌、肝癌等疾病患者体内芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的活性明显高于正常人体内。因此,医学上把抑制患者体内这两种酶活性作为治疗此类癌症的一种手段。本实验研究了不同浓度的亚硫酸钠、过氧化氢、十二烷基硫酸钠、次氯酸钠对两种酶活性的影响。亚硫酸钠、过氧化氢、十二烷基硫酸钠、次氯酸钠对芳香基硫酸酯酶有很好的抑制作用,半抑制浓度IC50分别为31.51、145.2、181.17、82.66μmol/L;次氯酸钠对β-葡萄糖醛酸酶的半抑制浓度IC50为784.4μmol/L;十二烷基硫酸钠对β-葡萄糖醛酸酶有抑制但是抑制效果有限,最大抑制程度约为38%;亚硫酸钠、过氧化氢对β-葡萄糖醛酸酶没有明显抑制效果。