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目的:阿尔茨海默症（Alzheimer’s Disease,AD）,是一种进行性发展的神经系统退行性疾病,课题组前期已证明补肾健脾开心方可能通过调控磷脂酰肌醇3激酶（Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（Protein kinase B,AKT）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（Mammalian target of rapamycin,mTOR）信号通路蛋白及炎症基因表达,达到阻止神经元破坏,从而延缓AD病程。但通过PI3K/AKT信号通路抑制自噬来改善AD相关因子的作用机制未能研究。本实验研究对象选取为D-半乳糖（D-galactose,D-gal）诱导的AD大鼠模型,通过在实验过程中观察补肾健脾开心方对AD模型大鼠学习记忆能力水平的影响,以及实验结束后检测实验大鼠脑皮质区的自噬指标微管相关蛋白1轻链3II（LC3-II）、Beclin、泛素结合蛋白P62和PI3K/AKT/mTOR通路的变化,探讨补肾健脾开心方是否能够通过调节脑皮质区PI3K/AKT/mTOR自噬通路延缓AD的病程进展,以期探索中医药防治AD成效及机制原理,为其在临床应用中提供实验数据支撑。方法:1.理论探讨:通过检索国内外AD相关文献,从中医学古今研究梳理AD的认识源流、证候分型及治法治则,以补肾健脾开心方的方药组成及治则治法入手,探析补肾健脾开心法对AD治疗的重要性;从现代西医学角度梳理AD的发病机制,分析AD与自噬以及PI3K/AKT/mTOR信号通路的关系,明确PI3K/AKT/mTOR自噬信号通路延缓AD的可能性。2.实验研究:SPF级雄性SD大鼠90只,3月龄,体重为220±20g。实验过程中动物自由摄食和饮水,23±2℃,相对湿度40-70%。适应性饲养1周后,用Y型水迷宫法进行初步筛挑选合格实验动物,纳入合格标准:每只大鼠进行Y型水迷宫实验测试15次,其中达12次及以上正确次数,以及饮食饮水大小便正常。参照《药理学实验》,制造D-gal大鼠AD模型。具体造模方法:配制30mg/m L质量浓度的D-gal-0.9%生理盐水溶液。对SD大鼠每日进行1次腹腔注射D-gal-0.9%生理盐水溶液,连续42d。造模时观察大鼠毛色、体重、饮食、活动及精神状态。每7d以Y字型水迷路筛选一次,若凡15次测试中正确路线次数较造模前下降1/3,则表示为造模成功。参照随机数字表,随机挑选造模成功大鼠中的60只,并平均分为5组,即:模型组、补肾组、健脾组、开心组、补肾健脾开心组,每组12只。此外,腹腔注射等量生理盐水的SD大鼠12只作为空白组。按照大鼠与人体表面积系数比,确定各中药治疗组实验给药量,剂量如下:健脾组（4.05g/kg·d）、补肾组（3.6g/kg·d）、开心组（2.34g/kg·d）、补肾健脾开心组（9.99g/kg·d）。以灌胃方式,给予每组给药实验大鼠药物治疗;空白组及模型组,灌胃同等体积去离子水,灌胃剂量均为1m L/100g,连续灌胃28d。给药实验结束后,对实验各组大鼠运用Morris水迷宫实验以测定学习记忆能力;用免疫印迹法检测各组实验动物脑皮质微管相关蛋白1轻链3（LC3）及Beclin蛋白水平的表达,用免疫组织化学法检测各组实验动物脑皮质PI3K、AKT、mTOR蛋白水平的表达;用实时荧光定量技术检测各组大鼠脑皮质Beclin、P62、mTOR的基因水平相对表达。结果:1.各组实验大鼠学习记忆能力的改变与空白组比较,模型组大鼠空间学习记忆能力明显下降（P＜0.01）;与模型组比较,各治疗组大鼠空间学习记忆能力改善（P＜0.01）。2.各组实验大鼠脑皮质LC3-II、Beclin的表达变化与正常组相比,模型组大鼠脑皮质LC3-II、Beclin的表达量降低（P＜0.01）;与模型组相比,各治疗组大鼠脑皮质LC3-II、Beclin的表达量升高（P＜0.05或P＜0.01）。3.各组实验大鼠脑皮质PI3K、AKT、mTOR的表达变化与正常组相比,模型组大鼠脑皮质PI3K、AKT、mTOR的平均光密度显著增加（P＜0.01）;与模型组相比,各治疗组大鼠脑皮质PI3K、AKT、mTOR的平均光密度明显降低（P＜0.05或P＜0.01）。4.各组实验大鼠脑皮质Beclin、P62、mTOR相对基因水平的表达变化与正常组相比,模型组大鼠脑皮质Beclin的相对m RNA表达明显减少（P＜0.01）;与模型组比较,各治疗组大鼠脑皮质Beclin的相对m RNA表达明显回升（P＜0.05或P＜0.01）。与正常组相比,模型组大鼠脑皮质P62、mTOR的相对m RNA表达明显升高（P＜0.01）;与模型组相比,各治疗组大鼠脑皮质P62、mTOR的相对m RNA表达明显降低（P＜0.05或P＜0.01）。结论:1.补肾健脾开心方能够有效改善AD病模型大鼠学习记忆能力异常。2.补肾健脾开心方能够激活自噬,保护神经元,使AD模型大鼠中脑皮质中自噬相关因子表达增加。3.补肾健脾开心方能够干预AD大鼠病程进展的作用机制可能是通过PI3K/AKT/mTOR信号通路激活细胞自噬,保护神经元免于大量损伤,从而达到阻止或延缓AD的进展性病程的目的。