目的:本文在“基于药典、基于市场、简便实用”的原则指导下,建立统一的金莲花药材商品等级评价标准,并通过对质量指标分析及评价,为金莲花药材市场流通时优质优价及临床用药安全提供科学的理论基础。方法:1.基于外观性状的金莲花药材商品规格等级标准初步制订查阅《中国药典》、地方标准和相关书籍;考察金莲花主产区河北、山西及内蒙古自治区等地,以及安国、亳州、荷花池等药材市场,对金莲花的品种分布、种植加工及等级划分等情况进行产地、实地调查;收集不同产地不同等级的金莲花药材作为实验样品。对收集的金莲花样品按照“花朵直径、杂质含量、花柄长度、颜色”等传统经验指标进行量化,并运用主成分分析、方差分析及相关性分析等统计学方法筛选出金莲花药材等级划分的外观性状指标,采用四分位数法初步建立金莲花药材商品等级标准。2.金莲花药材质量指标提取研究金莲花收载于1977年版《中国药典》,其质量标准项下仅有性状和鉴别项;基于此,本课题首先对收集的金莲花药材进行性状鉴别、显微鉴别及薄层鉴别;参照2020年版《中国药典》（四部）通则相关方法,对金莲花药材进行常规项检查,如水分、总灰分、浸出物等;采用紫外-可见分光光度法,建立金莲花药材总黄酮含量测定方法;采用一测多评法,建立适合金莲花高效液相色谱（HPLC）含量测定方法,并以荭草苷为内参物建立其余待测成分的相对校正因子和相对保留时间值。采用HPLC法,建立金莲花药材指纹图谱共有模式,并对金莲花特征图谱共有峰进行指认;采用统计分析软件对含量测定及指纹图谱共有峰数据进行分析。3.基于性状与质量相结合的金莲花商品规格等级标准的制订采用分析软件统计基于外观性状制订的不同金莲花药材商品规格等级与内在质量数据范围及均值并进行相关性分析、单因素方差分析。结果:1.（1）通过文献调研发现,历代本草专著及相关标准未有金莲花规格等级记载,仅记载了金莲花药材的品质评价且描述基本一致,即“以完整、色金黄、香气浓者为佳”。地方标准规定金莲花药材来源于毛茛科植物金莲花（Trollius chinensis Bge.）、宽瓣金莲花（Trollius asiaticus L.）、长瓣金莲花（Trollius macropetalus Fr.Schmidt.）、短瓣金莲花（Trollius ledebouri Reichb）的干燥花。（2）金莲花实地考察结果为:各大中药材市场售卖金莲花药材商行甚少,各大市场和主产地上的规格等级划分不明确,都是以花色金黄、花朵大为上品。（3）本课题组共收集51批金莲花药材样品,经中药鉴定室鉴定为27批金莲花（T.chinensis Bge.）,14批短瓣金莲花（T.ledebouri Reichb）,10批长瓣金莲花（T.maccropetalus Fr.Schmidt.）。（4）采用最低定级原则,金莲花药材商品规格等级标准拟定为:金莲花:以花色淡黄色至金黄色,色度值L*≥57,b*≥28,E*ab≥64为一级品,二级品花色棕黄色至黑褐色,色度值52≤L*＜57或22≤L*＜28或57≤E*ab＜64。短瓣金莲花:以花色淡黄色,色度值L*≥60,b*≥23,E*ab≥66为一级品,二级品花色黑褐色,色度值58≤L*＜60或19≤L*＜23或61≤E*ab＜66。长瓣金莲花:以花色淡黄色,色度值L*≥60,b*≥22,E*ab≥65为一级品,二级品花色黑褐色,色度值56≤L*＜60或16≤L*＜22或58≤E*ab＜65。宽瓣金莲花:统货,颜色不分。2.（1）不同品种金莲花性状区别明显,主要可以通过花萼数目和花瓣长短进行区分。以花粉粒、花萼上表皮乳突细胞、不定式气孔、花药串珠状表皮细胞、花粉囊内壁细胞、非腺毛等为主要显微鉴别特征。采用聚酰胺薄层板,以荭草苷和牡荆苷为对照品,以氯仿-丙酮-冰醋酸-无水乙醇（4:1:3:2）为展开剂,以1%三氯化铝乙醇溶液为显色剂,置紫外光灯（365nm）下检视,结果显示金莲花药材供试品与荭草苷、牡荆苷对照品在相应位置显示同样颜色的斑点。建立了金莲花药材的性状、显微、薄层鉴别项。（2）按2020年版《中国药典》四部通则相关方法测定金莲花药材的水分含量范围为6.40%~10.72%、浸出物含量范围为32.06%~43.78%、总灰分含量范围为7.79%~12.35%;统计分析结果显示,不同基原和产地水分、浸出物、总灰分含量范围均重叠严重且无显著差异。（3）金莲花总黄酮含量测定方法学研究表明:金莲花总黄酮在0.01~0.1 mg/m L浓度范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=10.211X+0.0089（r=0.9998,n=6）,平均加样回收率为98.38%;统计分析结果显示,不同基原和产地总黄酮含量范围均重叠严重且无显著差异。（4）一测多评法测定金莲花中5个黄酮类成分的含量结果表明:在定性上,相对保留时间在2台高效液相色谱仪3根色谱柱上较为稳定;在定量上,外标法与相对校正因子法含量测定值无差异,一测多评法可以代替外标法对金莲花药材中多成分进行含量测定;统计分析结果显示,不同基原金莲花5个黄酮类成分含量范围重叠严重,各个基原之间荭草素-2’’-O-β-L-半乳糖苷、牡荆苷、槲皮素含量无显著差异,而金莲花荭草苷含量分别与短瓣金莲花、长瓣金莲花荭草苷含量之间差异显著,短瓣金莲花与长瓣金莲花的荭草苷含量则不具有显著差异;金莲花香叶木素含量分别与短瓣金莲花、长瓣金莲花香叶木素含量之间无显著差异,短瓣金莲花与长瓣金莲花的香叶木素含量具有显著差异。不同产地金莲花5个黄酮类成分含量范围重叠严重,并且无显著差异。（5）建立了金莲花HPLC特征图谱,通过与混合对照品溶液色谱图中色谱峰的保留时间对比,共指认出6个共有峰,分别为荭草素-2’’-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷、牡荆苷、柚皮素、槲皮素、香叶木素。金莲花、短瓣金莲花和长瓣金莲花不同产地样品相似度均大于0.8。聚类分析基本将金莲花药材聚为一类,长瓣金莲花和短瓣金莲花聚为另一类。正交偏最小二乘判别分析结果与聚类分析结果一致。3.统计分析结果显示:金莲花不同等级之间的内在质量指标含量范围均有不同程度的重叠且无显著差异;短瓣金莲花除总灰分、总黄酮含量具有显著的范围及变化趋势且具有极显著差异,其余内在质量指标均有不同程度的重叠且无显著差异;长瓣金莲花除浸出物、总黄酮含量具有显著的范围及变化趋势且具有极显著差异,其中荭草苷含量具有显著差异但范围有部分重叠,其余内在质量指标均有不同程度的重叠且无显著差异。结论:在大量文献与市场产地调研的基础上,参考《225种常用中药材商品规格等级团体标准》等标准及相关文献,采用统计学分析方法筛选出色度指标L*、b*和E*ab作为金莲花药材等级划分的主要指标,初步提出了金莲花药材商品的等级标准。并且,结合金莲花内在质量的关联性,制订了合理可行的金莲花药材商品等级标准,为金莲花在市场流通上优质优价提供科学依据。另外,通过对51批不同基原、不同产地金莲花药材进行了性状、显微、薄层鉴别、常规检查项、5个黄酮类成分含量测定、总黄酮含量测定及特征图谱的研究,为完善金莲花药材质量标准提供了科学的参考。