亮氨酸对烧伤后兔肌肉蛋白代谢的作用

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第一部分 <13>C-亮氨酸示踪法测定兔烧伤后整体蛋白代谢改变研究 目的:通过沸水烫伤建立实验兔高分解代谢模型,利用<13>C-亮氨酸作为示踪剂,测定兔烧伤后整体水平的蛋白质代谢改变,观察其具体的代谢途径。 材料与方法:健康新西兰白兔20只(2.2-2.6kg,雌雄不拘),随机分为两组,即烧伤组和对照组。适应性喂养3天后,烧伤组建立15%总体表面积的Ⅲ度烧伤模型,对照组仅给予麻药和抗生素。继续喂养7天后行颈动静脉插管及气管切开插管,然后经颈静脉给予NaH<13>CO<,3>“首剂量10 μmol.kg<-1>+维持量10 μmol.kg<-1>.h<-1>”2小时,再改为<13>C-亮氨酸“首剂量4.2 μmol.kg<-1>+维持量4.2 μmol.kg<-1>.h<-1>”3小时,采集不同时间点的颈动脉血样及呼气样本,分别利用GC—MS仪和IRIS仪测定血中a-酮异己酸和呼气中二氧化碳的<13>C丰度,最后根据公式计算出蛋白质的分解率、合成率及氮平衡情况。 结果:烧伤一周后,烧伤组体重明显下降(-11.0%),而同期对照组体重表现为增加(+5.2%),两组间体重变化有显著差异(P<0.01)。与对照组相比,烧伤组的亮氨酸总更新率和氧化率明显升高,分别增加了92.3%和175%,说明机体整体蛋白分解率增加、负氮平衡加剧(P<0.01)。而与对照组相比,烧伤后的整体蛋白合成率虽有增加趋势(4.13±1.50 g.kg<-1>.d<-1> vs 2.69±0.88 g.kg<-1>.d<-1>),但无统计学意义(P=0.15)。 结论:1.成功建立兔高分解代谢模型,烧伤后整体蛋白分解加剧、负氮平衡显著:2.<13>C-亮氨酸示踪法测定整体蛋白质代谢水平行之有效。 第二部分亮氨酸对烧伤后兔肌肉蛋白质代谢的作用研究 目的:以<13>C-苯丙氨酸为示踪剂,观察不同亮氨酸浓度的肠外营养液对家兔烧伤后肌肉蛋白质代谢的作用,并进一步探讨其作用机制。 材料与方法:健康新西兰白兔40只(2.2-2.6kg,雌雄不拘),同第一部分建立烧伤模型并继续喂养,在烧伤后第7天行颈动静脉插管、左侧肾动静脉插管和左肾切除术。术后随机分为四组,经颈静脉给予不同的营养支持,分别为普通糖水组(G1u组)、标准肠外营养组(SPN组)、支链氨基酸肠外营养组(BCAA组)、和高亮氨酸肠外营养组(Leu组),三组肠外营养液等氮等热卡配置,输注量为非蛋白热卡6.25 kcal/h,氮量52.5mg/h,四组之间总的热卡供应相等,为7.63kcal/h。营养支持1小时后经颈静脉同时给予<13>C-苯丙氨酸“首剂量1l μmol.kg<-1>+维持量11 μmol.kg<-1>.h<-1>”6小时,另经肾动脉持续给予3%对氨基马尿酸钠作为血流示踪剂,速度为4.8ml/h。成对采集不同时间点的颈动脉和肾静脉血样,分别利用GC-MS仪和分光光度计测定其中的苯丙氨酸浓度、丰度和对氨基马尿酸钠的浓度,最后根据公式计算出双下肢肌肉蛋白的代谢参数。 结果:与Glu组相比,BCAA组和Leu组在蛋白合成率方面均有显著提高,且以Leu组更为明显;三组肠外营养液中,只有Leu组有明显改善氮平衡的作用,并获得正氮平衡,但同时其蛋白分解率也明显增加。Glu组和SPN组之间、SPN组和BCAA组之间的各项蛋白代谢参数均无统计学差异。 结论:亮氨酸强化营养液可促进烧伤后兔肌肉蛋白质合成代谢,从而改善氮质平衡。
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