基于点击化学的荧光传感器的应用研究

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点击化学反应是一类通过拼接小单元结构分子,进而快速、可靠地合成各种各样大分子的反应。点击化学反应因具有原料易得、操作简单、反应条件温和、抗干扰性强、产率高等优点,被广泛应用于表面功能化修饰、大分子合成、蛋白质、DNA等研究领域。本文主要利用Cu(Ⅰ)催化叠氮香豆素与带有端炔基的物质发生点击反应的机理,设计了四种荧光传感器,并应用于实际样品的分析测试。本论文共有五章,主要内容如下:第一章为绪论。主要介绍了点击化学反应的概念、类型、特点,并简要介绍了化学传感器中荧光传感器和酶联免疫传感器的原理、特点及应用;接着重点介绍了 Cu(Ⅰ)催化点击化学反应(CuAAC)在生物大分子、比色分析、荧光分析、电化学分析等方面的研究;最后引出本篇论文的研究目的和内容。第二章构建了一种基于点击化学检测Cu(Ⅱ)的荧光传感器。Cu(Ⅱ)的存在可以引起叠氮香豆素与端炔基反应生成强荧光物质,体系的荧光强度与Cu(Ⅱ)成一定的线性关系。传感器检测范围为0.25 μM-2.5 μM,检测限为0.08 μM。该传感器具有灵敏度高、选择性好等特点,成功应用于血清中Cu(Ⅱ)的测定。第三章构建了一种基于点击化学检测丙炔氟草胺农药的荧光传感器。含有端炔基团的农药丙炔氟草胺在Cu(Ⅰ)催化下,能够与叠氮香豆素反应生成1,2,3-三唑五元环化合物,反应后体系荧光强度增大,从而实现对丙炔氟草胺的检测。传感器检测范围为0.25 μg/L-6.0 μg/L,检测限为0.184 μg/L。第四章构建了一种检测炔雌醇环境干扰物的荧光传感器。含有端炔基团的雌性激素炔雌醇与叠氮香豆在Cu(Ⅰ)催化下反应生成具有强荧光的1,2,3-三唑五元环化合物。传感器检测范围为0.1 μg/L-2.5 μg/L,检测限为0.05 μg/L。第五章结合酶联免疫分析法和点击化学构建了一种检测甲胎蛋白肿瘤标记物的荧光传感器。首先将氧化铜修饰到甲胎蛋白多抗上,合成多抗-氧化铜复合物;其次在酶联免疫板上铺上甲胎蛋白单抗,特异性结合甲胎蛋白后,再加入事先合成的甲胎蛋白多抗-氧化铜复合物,从而将氧化铜富集到免疫板上;加酸酸化后得Cu(Ⅱ),Cu(Ⅱ)可以被抗坏血酸钠还原为Cu(Ⅰ),从而催化丙炔醇和叠氮香豆素发生点击反应,体系荧光增强,从而实现对甲胎蛋白的检测。传感器检测范围为 0.025 ng/mL-5.0ng/mL,检测限为 0.012ng/mL。
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