自供氧光敏药物制剂的设计合成及其抗肿瘤应用研究

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癌症是一种死亡率高且治愈率低的疾病。当前的癌症治疗方法包含手术治疗、放疗、化疗和生物疗法,但由于它们的副作用和不良预后,很难满足现阶段的临床需求。与天然酶相比,纳米酶由于其具有高稳定性、低成本和易于制备等优点而引起了广泛的应用,特别是在癌症治疗领域。第一种是直接通过纳米酶的氧化酶(Oxidase,OXD)、过氧化物酶(Peroxidase,POD)活性增加体内的活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS);第二种是间接杀死,这与纳米酶的过氧化氢酶(Catalase,CAT)或超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性有关,其可通过光,声或化学途径的帮助来减轻肿瘤微环境的缺氧情况以增强癌症治疗效果。一直以来,贵金属纳米材料如金纳米棒(Au NRs)由于具有可调控的局部表面等离振子共振效应和纳米酶活性而被广泛研究。单一Au NRs的催化活性是十分有限的,金基纳米材料尤其是各种结构的金铂基复合纳米粒因为其具有OXD、CAT、POD和SOD活性而受到关注。众所周知,通过调控纳米酶的尺寸、形态和组成,可以很好地控制纳米酶的催化性能。本论文中,我们首先设计并合成了哑铃状的铂金纳米棒(Pt-Au NRs),通过透射电子显微镜(TEM)、高分辨透射电子显微镜(HRTEM)、X射线衍射仪(XRD)等手段对Pt-Au NRs的结构形态以及元素组成进行表征;通过Zeta电位分析仪对Pt-Au NRs的表面电位进行检测。结果显示Pt-Au NRs为长径比约3.45的哑铃状纳米棒,尺寸均一,表面为甲氧基聚乙二醇巯基(MPEG5000-SH)修饰,表明Pt-Au NRs的成功制备。通过电化学分析法验证了Pt-Au NRs由于其优异的结构效应可以在激光照射下有效转移热电子,然后通过ESR和DPBF检测法验证了在激光照射下,Pt-Au NRs具有出色的产氧能力和1O2产生能力,即具有光触发的模拟生物体内CAT酶和光催化促进1O2产生的性质。在人乳腺癌细胞(MDA-MB 231)通过CCK-8检测了不同浓度Pt-Au NRs孵育后有/无的细胞活性,结果表明无激光照射下Pt-Au NRs具有良好的体外生物相容性,在给予808nm激光照射后,Pt-Au NRs的细胞毒性随着其浓度的增加而增加;通过共聚焦显微镜观察Pt-Au NRs与细胞溶酶体的共定位来判断Pt-Au NRs的细胞摄取情况,结果表面Pt-Au NRs可以进入细胞溶酶体,并且会发生溶酶体逃逸;通过DCFH-DA探针和共聚焦显微镜检测Pt-Au NRs在细胞内产生活性氧((Reactive oxygen species,ROS)的能力。此外,体内抗肿瘤实验证明Pt-Au NRs在有激光照射的情况下能显著抑制肿瘤的生长,肿瘤体积明显减小,表现出优异的光动力治疗效果。综上,本论文设计合成的Pt-Au NRs具有光触发的类酶活性,可以在808nm激光照射下分解过氧化氢产生氧气,同时促进单线态氧的生成,提高肿瘤细胞毒性,有效引起肿瘤细胞凋亡。由于Pt-Au NRs的催化活性是由光作为外部刺激来可逆调节的,因此本研究为肿瘤的精准光催化治疗提供了新的理论基础、实验基础和设计思路。
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