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背景与目的:随着环境污染的加重、工作压力的增加及生活节奏的加快，全球肿瘤的发病率逐年增加，跃居成为人类的第一大杀手，而女性患者中以乳腺癌最为常见。据美国权威杂志CA CANCER J CLIN最新文献报道，2010年美国乳腺癌新发病人数占总人口的28％，死亡率达15％。而在过去的十年，我国仅城市女性乳腺癌的发病率就以20-30％的速度不断攀升。手术、放疗、化疗以及内分泌治疗等传统治疗手段有效地延长了乳腺癌患者的生存期，但是乳腺癌患者仍然存在较高的复发率、死亡率。 近年来，随着分子生物学的快速发展，靶向治疗在乳腺癌治疗中的地位逐步被重视。曲妥珠单抗(Trastuzumab)是针对HER-2/neu原癌基因产物的人源化单克隆抗体，能特异地作用于HER-2受体阳性的转移性乳腺癌。其作用机制为特异结合于HER2受体胞外段，阻断HER2同源二聚体的组成性激活，并干扰HER2与其它ErbB家族成员形成异源二聚体，阻断下游信号通路，抑制肿瘤的生长。但是，单药Trastuzumab的客观有效率12-34％，并且初始接受Trastuzumab治疗有效的病人通常在1年内产生耐药。Trastuzumab与紫杉醇、蒽环类药物等化疗药物联合，能够显著提高患者的无病生存率达50％以上。 组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACis)对血液系统恶性肿瘤及卵巢癌、非小细胞肺癌等具有潜在的抗肿瘤特性，可以增强化疗药物的抗肿瘤作用，具体机制尚不清楚。作为HDACis的一种，丁酸钠(NaB)通过抑制依赖锌指结构的组蛋白去乙酰化酶，诱导组蛋白乙酰化，引起染色体结构解聚，从而促进转录的进行;同时可以调控非组蛋白的蛋白乙酰化程度。课题小组前期实验也证实，NaB作用于乳腺癌细胞MCF-7，可能是通过上调抑癌基因p27Kip1蛋白的表达，阻滞细胞周期，从而抑制细胞增殖，诱导肿瘤细胞凋亡。 因此，为了探讨新的乳腺癌的治疗模式，本实验利用NaB和Trastuzumab作用于HER-2不同表达的乳腺癌细胞，观察对细胞增殖、周期、凋亡的影响，并探讨其可能的作用机制。 方法:三株HER-2不同表达的乳腺癌细胞(SKBR3细胞、MCF-7细胞、HCC1937细胞)经过NaB、Trastuzumab或者二者联合作用后，通过MTT法检测细胞增殖情况，流式细胞仪分析细胞周期分布及细胞凋亡，RT-PCR方法检测HER-2和p27kip1 mRNA水平，免疫荧光方法检测HER-2和p27Kip1蛋白的表达。 结果:NaB单独用药可抑制三株乳腺癌细胞株的细胞增殖，促进细胞周期阻滞，诱导细胞凋亡和促进p27Kip1蛋白的表达(P＜0.05); Trastuzumab对细胞增殖、周期及凋亡的影响不大，仅在浓度为20μg/mL时，可抑制SKBR3细胞增殖和诱导细胞周期停滞(P＜0.05)，上调p27Kip1mRNA和蛋白的表达。当两药联合时，能够明显增加对SKBR3乳腺癌细胞的杀伤作用及p27Kip1 mRNA(P＜0.05)和蛋白表达，而对MCF-7细胞及HCC1937细胞的影响较小。 结论: NaB联合Trastuzumab能显著抑制HER-2高表达的SKBR3乳腺癌细胞的增殖，诱导细胞周期停滞及增加细胞的凋亡，以上过程可能与上调p27Kip1的表达有关。