【摘 要】
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目的:通过γ-促分泌酶抑制剂阻断毛细支气管炎小鼠体内的Notch信号,观察小鼠肺组织的病理学表现、检测各组小鼠体内Th9相关细胞因子和蛋白的变化,并研究其与毛细支气管炎发病机制的关系,为毛细支气管炎的治疗提供新思路。方法:选取雄性SPF级Balb/c小鼠30只,随机分为3组(正常对照组、γ-促分泌酶抑制剂组简称实验组、毛细支气管炎组简称RSV组),每组10只。RSV组应用RSV病毒建立毛细支气管炎
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目的:通过γ-促分泌酶抑制剂阻断毛细支气管炎小鼠体内的Notch信号,观察小鼠肺组织的病理学表现、检测各组小鼠体内Th9相关细胞因子和蛋白的变化,并研究其与毛细支气管炎发病机制的关系,为毛细支气管炎的治疗提供新思路。方法:选取雄性SPF级Balb/c小鼠30只,随机分为3组(正常对照组、γ-促分泌酶抑制剂组简称实验组、毛细支气管炎组简称RSV组),每组10只。RSV组应用RSV病毒建立毛细支气管炎模型,γ-促分泌酶抑制剂组在造模后建立γ-促分泌酶抑制剂在体干预模型,正常对照组不做特殊处理。观察各组小鼠临床表现及肺组织病理学炎症改变,检测Th9细胞及相关因子和蛋白在各组小鼠肺组织中的表达水平。结果:1.正常对照组小鼠的毛发、呼吸、运动等方面没有明显异常表现,即没有明显的毛细支气管炎的症状;RSV组小鼠在造模结束后均出现不同程度的呼吸困难、喘息、口周发绀等毛细支气管炎症状;γ-促分泌酶抑制剂组(实验组)造模结束后毛细支气管炎症状较RSV组症状明显减轻。2.HE染色结果发现正常对照组的小鼠肺组织无明显炎症改变,肺泡及支气管镜下表现基本正常;RSV组小鼠有明显炎症改变,镜下具体表现为炎症细胞广泛浸润,肺泡腔及管腔减小,粘膜明显变厚;实验组与RSV组相比其炎症改变较轻,管腔减小程度轻,管腔周围炎症细胞浸润减少,粘膜增厚程度也减轻。3.免疫组织化学染色检测PU.1蛋白在正常对照组小鼠肺组织的表达量很低;相反,其在RSV组小鼠肺组织表达量相较于正常组显著增多;实验组相比于RSV组蛋白表达量则明显减少,差异均具有统计学意义(P<0.05)。4.通过Western blot法检测结果提示RSV组相比于正常组小鼠肺组织中NICD-1、PU.1蛋白的表达增多;相反,实验组较RSV组小鼠肺组织蛋白的表达则下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。5.分别利用ELISA法检测各组小鼠肺泡灌洗液中白介素4、9的含量,结果显示γ-促分泌酶抑制剂组相较于RSV组其浓度明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.Notch信号的活化被γ-促分泌酶抑制剂(MW167)抑制;2.受抑制的Notch信号可减少Th9及其细胞因子IL-9的产生;3.毛细支气管炎的严重程度与IL-9及Th9细胞特异性蛋白PU.1含量密切相关,说明IL-9可反应毛细支气管炎气道炎症程度;4.γ-促分泌酶抑制剂(MW167)可以通过阻断Notch信号通路来减少IL-9的产生,进而减轻毛细支气管炎症状。
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