【摘 要】
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Rab23是Rab家族的一员,Rab属于小GTPase类,它参与细胞内的囊泡运输,控制膜相关蛋白的转运。已证实Rab23作为SHH信号通路关键的负调控因子参与脊椎动物多种组织的发育分化,其作用
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Rab23是Rab家族的一员,Rab属于小GTPase类,它参与细胞内的囊泡运输,控制膜相关蛋白的转运。已证实Rab23作为SHH信号通路关键的负调控因子参与脊椎动物多种组织的发育分化,其作用机制可能是Rab23调控该通路中Smo与Gli之间的某些膜相关蛋白的定位。Rab23在人类的突变可导致以颅缝早闭、多指、并指、肥胖为主要表现的Carpenter综合征的出现,提示其影响人类的胚胎发育。我们以斑马鱼为动物模型,对Rab23在斑马鱼胚胎早期发育中的功能进行了初步探讨。我们首先需要明确野生型斑马鱼Rab23的时空表达模式:然后利用吗啉代寡核苷酸技术(Morpholino oligonueleotides,MO)抑制斑马鱼胚胎Rab23的表达,观察Morphants出现的特异表型,并通过原位杂交检测斑马鱼胚胎早期发育相关的标志基因的表达情况,进而推断Rab23在斑马鱼胚胎早期发育中的作用。原位杂交显示Rab23在野生型斑马鱼胚胎20-体节期以前呈广泛性表达,随着发育进行,Rab23在尾部的表达减少并最终集中表达于头部及前部中枢神经系统。Rab23 Morphants在早期出现了以体轴变短为主要表现的异常表型,最终出现了体轴变短、小头、小眼、体节杂乱,甚至更严重的畸形。同时,我们发现原肠作用细胞运动相关的标志基因hgg、dlx3、ntl及中枢神经系统的标志基因pax2、pax6的表达均出现异常。根据这些证据,我们得出结论:Rab23对于斑马鱼胚胎的原肠胚形成是必需的,并影响了中枢神经系统的发育。其具体作用机制及其与SHH等信号通路的关系有待进一步研究。
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