目的:肝脏是人体内最大的实质性脏器,具有重要的代谢和清除功能。病毒感染,创伤,化学试剂等各种原因均可引起急性肝损伤和持续的炎症反应,最终发展成其他不良后果。自噬是体内必不可少的细胞保护途径,其响应于应激、炎症和微生物感染等各种刺激而快速活化。最近的许多研究发现自噬在各种肝损伤中可能具有保护作用。京尼平已被证明具有抗炎、抗菌和抗氧化等作用,但是京尼平能否通过自噬缓解急性肝损伤仍然有待研究。本研究的主要目的在于探索京尼平在急性肝损伤中的保护作用和相关机制,为肝损伤的治疗提供新的靶点。方法:动物实验以C57BL/6小鼠为主要研究对象,CCl₄诱导急性肝损伤模型,京尼平预处理。通过HE染色观察肝组织病理改变,全自动生化分析仪检测血清ALT及AST水平,Western Blot检测肝脏自噬通路相关蛋白的表达,电镜观察肝细胞内自噬体及自噬溶酶体的改变,Milliplex检测血清炎症细胞因子的表达水平。细胞实验以小鼠正常肝细胞AML12为主要研究对象,IL-6诱导肝细胞损伤后,通过RT-PCR检测炎症因子的表达;转染GFP-RFP-LC3质粒后,显微镜下观察荧光数量变化。结果:1.CCl₄诱导肝损伤后血清ALT及AST水平显著增高,肝细胞坏死、炎症细胞浸润明显增加;京尼平预处理后降低血清ALT及AST水平并且明显改善肝细胞坏死。2.与CCl₄单独作用相比,京尼平预处理后血清促炎细胞因子IL-1β、IL-6、CCL20的表达水平明显降低,抗炎细胞因子IL-10的表达水平明显升高;同时,京尼平显著抑制NF-κB信号通路的激活;此外,与CCl₄组相比,京尼平预处理后IL-33、IL-17的表达水平降低,但差异无统计学意义。3.对自噬通路相关蛋白的研究发现,与CCl₄组相比,京尼平预处理后自噬相关蛋白Atg12、Atg5和Atg7、LC3-II的表达水平明显增加,p62蛋白表达水平明显降低;但无论在任何组内,Beclin1蛋白的表达水平无明显变化。4.电镜观察显示CCl₄组肝细胞内自噬体数量增加,京尼平处理后自噬体数量进一步增加。5.研究自噬上游信号通路发现,与CCl₄组相比,京尼平预处理后可明显增加p-p38的表达水平,对p-ERK和p-JNK的表达水平无影响;此外京尼平预处理显著降低p-mTOR的表达水平。6.AML12细胞转染GFP-RFP-LC3质粒后,发现京尼平干预后红色及黄色荧光点的数量明显增加。用自噬抑制剂3-MA预处理后明显逆转京尼平的这些作用。结论:京尼平能够显著减轻CCl₄诱导的急性肝损伤,并且其保护作用可能通过调节自噬信号通路来实现。京尼平作为一种新的自噬诱导剂可能不仅可以用来治疗肝损伤,而且可能作为研究自噬调节的新型分子探针。