三种途径移植HUCMSCs对大鼠SCI后神经功能修复影响的研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoping123123
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
[目 的]本研究通过建立SD大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)模型,比较局部注射、腰椎鞘内注射、股静脉注射三种移植途径的神经功能修复的疗效,为人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSCs)治疗SCI的最佳移植途径提供实验依据,找到更适合临床应用的细胞移植途径。[方 法](1)SPF级健康成年雄性SD大鼠采用动脉夹夹闭脊髓建立急性SD大鼠T10节段SCI动物模型,随机分配到假手术组(Sham组)、模型组(SCI组)、生理盐水组(NS组)、局部途径组(ILT组)、鞘内途径组(ICT组)、股静脉途径组(IVT组),每组9只。(2)损伤后3d后,局部途径组:经局部损伤区域头、尾端分别注射HUCMSCs 5μL(5×105个/μL),共计10μL;鞘内途径组:经腰椎鞘内注射HUCMSCs 10μL(5×105个/μL);股静脉途径组:经股静脉注射HUCMSCs 10μL(5 × 105个/μL)。(3)对所有动物在造模前1d、造模后1d、移植干细胞后7d、14d和21d采用BBB评分量表对大鼠后肢运动功能进行评分。(4)大鼠血清和脊髓切片标本取自移植后7d、14d、21d三个时间点。通过以下方法确定各组SCI的神经功能修复疗效:①采用ELISA测定血清中IL-1β、IL-6和BDNF表达量观察微环境的调节;②采用HE染色观察各组大鼠脊髓标本的形态结构;③采用LFB染色观察各组大鼠脊髓的脱髓鞘化情况;④采用免疫荧光染色检测观察大鼠损伤区的Nestin和GFAP的表达情况。[结 果](1)BBB运动功能评分量表的结果显示,与Sham组相比,大鼠SCI后BBB评分降低,后肢运动功能受损;与NS组相比,三种途径移植HUCMSCs均能提高大鼠SCI后的运动功能评分;ILT组、ICT组和IVT组三组相比,三种途径移植HUCMSCs在改善运动功能方面没有差异。(2)大鼠血清ELISA检测结果显示,与Sham组相比,大鼠SCI后血清中IL-1 β和IL-6水平增高,BDNF水平降低;与NS组相比,三种途径移植HUCMSCs均能减轻炎症反应并促进神经生长因子的表达;ILT组、ICT组和IVT组三组相比,局部途径、腰椎鞘内移植HUCMSCs在减轻炎症反应并促进神经生长因子的表达方面优于股静脉途径。(3)脊髓标本的HE染色结果显示,与Sham组相比,大鼠SCI后脊髓组织早期出血坏死、细胞结构紊乱以及炎症细胞浸润,损伤后期持续炎症反应、胶质瘢痕以及脊髓空洞形成;与NS组相比,三种途径移植HUCMSCs均能减轻大鼠SCI的严重程度、炎症反应及脊髓空洞化;ILT组、ICT组和IVT组三组相比,三种途径移植HUCMSCs在脊髓标本上的变化趋势相近。(4)LFB染色结果显示,与Sham组相比,大鼠SCI后脊髓组织明显脱髓鞘化,髓鞘排列紊乱;与NS组相比,三种途径移植HUCMSCs减轻了大鼠SCI后脊髓组织脱髓鞘的情况;ILT组、ICT组和IVT组三组相比,三种移植途径在减轻损伤区域脱髓鞘化方面没有差异。(5)IF染色结果显示,与Sham组相比,大鼠SCI后脊髓组织中Nestin蛋白表达量减少,GFAP蛋白表达量增加;与NS组相比,三种途径移植HUCMSCs均促进了 Nestin蛋白表达量的增加,抑制了 GFAP蛋白表达量的增加;ILT组、ICT组和IVT组三组相比,局部途径移植HUCMSCs在诱导神经干细胞并抑制向神经胶质细胞分化方面优于腰穿途径,股静脉途径最差。[结 论](1)局部途径、腰椎鞘内途径,股静脉途径三种方式移植HUCMSCs均可修复SCI后功能障碍;(2)移植HUCMSCs通过促进大鼠SCI后运动功能的恢复,减轻损伤区域脊髓的炎症反应、空洞化和髓鞘化,促进神经生长因子表达,诱导神经干细胞的增殖并抑制向神经胶质细胞分化来实现修复SCI的功能;(3)局部途径移植HUCMSCs的疗效优于腰椎鞘内途径,股静脉途径最差。
其他文献
[目的]本实验以人咽鳞状细胞癌Fadu肿瘤细胞为研究对象,在实验中探索EGFRmAb-AuNRs靶向光热作用对下咽癌恶性肿瘤细胞的生物学行为的影响。[方法]本实验采用mAb-EGFR功能化修饰的纳米金棒在近红外激光的照射下诱导人下咽癌Fadu细胞焦亡;采用激光共聚焦显微镜记录不同处理方案下Fadu细胞形态的变化及流式细胞仪,乳酸脱氢酶(Lactic dehydrogenase,LDH)法,ELIS
学位
[目 的]探讨晶状体损伤后促进视神经再生过程中MMP-8及MMP-12的表达变化规律。[方 法]SD大鼠用30G针头穿透角巩膜缘通过破坏晶状体囊袋逐渐形成外伤性白内障与此同时行同侧视神经(距眼球约0.2-0.5 mm,位于视神经眶内段)钳夹性损伤,制作实验动物模型。实验动物分为视神经损伤联合晶体损伤组(ONL)、单纯视神经损伤组(ON)、单纯晶状体(L)、假手术组(Control)。在术后第14天
学位
[目 的]基于前期研究提示HDAC2可能是舌癌发病的关键基因。为此本研究探讨静默HDAC2对舌癌细胞的生物学行为的影响,明确HDAC2作为舌癌诊断、治疗靶点的意义。[方 法]选取三种高表达HDAC2舌癌细胞系,设计针对HDAC2的干扰片段,慢病毒包装细胞系包装,慢病毒感染舌癌细胞及嘌呤霉素筛选在舌癌细胞中稳定抑制HDAC2表达;设立阴性对照组(shRNA-NC)、空载体组(HDAC2-EV)、未处
学位
[目 的]探究云南不同民族育龄期女性卵巢储备功能相关的基因,探讨其可能的遗传学机制,从而对云南不同民族育龄期女性给予个体化、更科学的生育指导及助孕方案。[方 法]我们收集了 2017年1月至2021年6月期间在昆明医科大学第一附属医院进行外周血AMH检测的云南汉族、彝族、白族育龄期女性的数据,按民族和年龄段分组,分析比较不同民族育龄期女性外周血AMH水平的差异。选取年龄、BMI匹配的汉族、彝族、白
学位
[目的](1)对复发性外阴阴道假丝酵母菌病(Recurrent vulvovaginal candidiasis,RWC)、外阴阴道假丝酵母菌病(Vulvovaginal candidiasis,VVC)患者的阴道致病白假丝酵母菌进行筛选,选出天冬氨酸蛋白酶(Aspartic acid Protease,Sap)、磷脂酶(Phospholipases,PL)酶活性均为阳性的菌株,比较Sap、PL酶
学位
当今电子科技发展与互联网时代大潮滚滚而来,不可避免的是电子元件散热问题,蛇形微通道散热器由于其占用空间小,以及优秀的散热性能在电子设备散热中取得优势,有助于打破边界层。随着电子元件产生的热流密度越来越高,微通道中的相变是不可回避的问题。本文对蛇形微通道采用数值模拟计算手段研究纳米流体在未相变以及相变下流动散热特性。本文分别以Cu,Al,Al2O3,Si O2纳米颗粒与水形成的纳米流体作为工质进行研
学位
[目 的]卵巢癌是常见的妇科癌症,其发病率在妇科恶性肿瘤中排名第三,但其病死率位于妇科恶性肿瘤之首。既往研究表明lncRNA在肿瘤的发生、发展中发挥着重要作用。有报道lncRNAMEF2C-AS1能够抑制宫颈癌及乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,但尚未见其在卵巢癌中的生物学功能的研究。本研究通过细胞实验探索lncRNAMEF2C-AS1在卵巢癌恶性表型中的生物学功能及机制,为探讨卵巢癌发病机理提供理论
学位
[目 的]探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)能否通过调控细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase,ERK)信号通路,减轻氧化应激和炎症反应,抑制心肌细胞凋亡,改善脂质代谢紊乱,缓解胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)大鼠心肌纤维化(myocardial fibrosis
学位
[目的]急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)是一种进展迅速的恶性肿瘤,其特征是骨髓中造血前体细胞分化不成熟和异常增殖。成人AML在白血病中发病率和死亡率都较高,尽管近些年AML治疗已经取得长足的进展,联合化疗、靶向治疗、造血干细胞移植等使得患者的五年生存率有了显著提升,但是部分患者预后不良,复发率和死亡率仍然很高。研究发现,长链非编码RNA(long non-co
学位
[目 的]1.探究糖尿病鼠内皮祖细胞外泌体(即db/db EPC-EXOs)与非糖尿病鼠内皮祖细胞外泌体(即db/+EPC-EXOs)之间的功能差异。2.探寻 db/db EPC-EXOs 与 db/+EPC-EXOs 之间的差异 miRNA。3.研究差异miRNA对C166细胞功能的影响。[方 法]1.通过Ficoll密度梯度离心法分离内皮祖细胞,并对EPCs形态、表面标志物(CD34、CD13
学位