【摘 要】
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内切β-1,4-葡聚糖酶(EC3.2.1.4)，又名内切纤维素酶，是纤维素酶系中的重要组成部分，能随机水解纤维素的β-1,4-葡萄糖苷键，产生纤维低聚糖，目前广泛应用于饲料、食品、纺织和洗涤等工业。此外，内切纤维素酶可以非专一性水解壳聚糖，生成功能性低聚糖——壳寡糖(Chitosan oligosaccharides, COS)。本研究主要对Thermobifida fusca内切β-1,4-葡聚
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内切β-1,4-葡聚糖酶(EC3.2.1.4)，又名内切纤维素酶，是纤维素酶系中的重要组成部分，能随机水解纤维素的β-1,4-葡萄糖苷键，产生纤维低聚糖，目前广泛应用于饲料、食品、纺织和洗涤等工业。此外，内切纤维素酶可以非专一性水解壳聚糖，生成功能性低聚糖——壳寡糖(Chitosan oligosaccharides, COS)。本研究主要对Thermobifida fusca内切β-1,4-葡聚糖酶Cel5A进行克隆，并在大肠杆菌宿主中表达，研究了重组酶的酶学性质，并利用重组酶进行壳寡糖的
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磷脂酶C（Phospholipase C，简称PLC）是一种能够水解甘油磷脂C3位点酯键的脂类水解酶。本文筛选出一株产磷脂酶C活性较高的铜绿假单胞菌，克隆了与产磷脂酶C相关的编码基因，构建了重组大肠杆菌，并对其发酵条件进行了优化，研究结果如下：利用卵黄硼砂平板法和NPPC法筛选到一株产磷脂酶C (Phospholipase C，PLC)活性较高的菌株，命名为铜绿假单胞菌(Pseudomonas a
本论文以法夫酵母（Xanthophyllomyces dendrorhous）为出发菌株，利用全细胞生物转化法发酵生产新科斯糖。首先在5L发酵罐中对发酵过程进行优化，以30g/L蔗糖和45mL/L玉米浆为发酵培养基，以法夫酵母生物量和法夫酵母所产6G-果糖基转移酶的活性为指标，采用单因素试验考察了pH、通气量以及不同补料方式对发酵过程的影响，最终确定最佳的发酵条件为pH8.0，通气量5~8L/mi
本文基于“发酵生态工程学”理论，借鉴本实验室的“酒精沼气双发酵耦联工艺”对柠檬酸厌氧出水回用技术进行了研宄。在已优化的营养条件基础上，通过单因素发酵实验对实验室保存的黑曲霉(niger) Wml-016进行了工艺条件优化。确定最佳条件为：种子培养时的孢子接种量不低于7.0xl05个/mL，种龄20-22h，初始pH5.5，接种量15%，装液量40mL/500mL，转速260r/min。经优化后摇瓶
抗坏血酸过氧化物酶（AscorbatePeroxidase，APX，EC1.11.1.11）是一种以抗坏血酸为电子供体的过氧化物酶，是细胞抗氧化系统的重要组成部分。本课题来源于国家自然科学基金，总体目标是研究APX在芥蓝中的生理作用。植物中的APX纯化难度大且体外稳定性差，妨碍了对其性质的研究；在大肠杆菌中表达植物重组APX，因受血红素合成的限制活性低。本论文将芥蓝APX基因（Ba-APX）在大肠
磷脂酶A_1(Phospholipase A_1，简称PLA_1，EC3.1.1.32）能特异性水解多种磷脂Sn-1位上的脂肪酸，生成游离脂肪酸和溶血性磷脂。近年来，市场上已经出现多种磷脂酶A_1产品，并在油脂脱胶、医药、皮革及食品加工等行业得到广泛推广，应用前景广阔。国内外对磷脂酶A_1的研究起步较晚，目前发现产磷脂酶A_1的微生物仅有少数几个属种，且酶活较低。本研究采用特殊的平板显色法筛选出高
本研究以一株尿嘧啶缺陷型树干毕赤酵母FPL-UC7为出发菌株，借助基因组规模代谢网络模型进行模拟分析，设计琥珀酸最佳合成途径，进而利用基因工程手段对关键调控点进行了一系列代谢改造，以提高琥珀酸的产量。主要的研究结果如下：(1)利用全基因组代谢网络模型iTL885模拟获得合成琥珀酸代谢改造靶基因。分别模拟增强三条琥珀酸合成途径，结果表明：过量表达大肠杆菌磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因ppc或
D-阿拉伯糖异构酶(D-arabinose isomerase，简称D-AI，EC5.3.1.3)，可催化D-阿拉伯糖（醛糖）异构化为D-核酮糖（酮糖）。本文对在偏酸性条件下具有较高酶活的D-AI进行了重组表达，并研究了D-塔格糖的转化。D-塔格糖是自然界中存在但较为稀少的天然已酮糖，在食品、医疗和保健等方面具有非常特殊的应用价值。近年来，有研究发现D-塔格糖不仅仅是一种稀有糖，还是一种新型的功能
RAVE (Regulator of the proton-translocating ATPases of the Vacuolar and Endosomal membranes)是参与V-ATP酶的V1与Vo可逆组装的重要蛋白。RAVE主要由Rav1p、 Rav2p和Skplp三个亚基构成。在酿酒酵母细胞中,当葡萄糖耗尽时,V-ATP酶分解成V1与Vo两部分,此时RAVE与V1以复合物的形式
纤维寡糖是一种功能性低聚糖，可广泛应用于饲料和养殖业、食品工业、化妆品工业和制药工业等多个领域，前景十分广阔。大豆抗毒素是大豆在受到外源刺激时产生的一种低分子量植物抗毒素，具有抗氧化和抗肿瘤的生物学效应。本文主要从以下几个方面进行了研究。（1）为了得到纤维寡糖对照品，采用混酸降解微晶纤维素，用活性炭柱层析法对得到的纤维寡糖混合物梯度洗脱，得到聚合度分别为2—5的纤维寡糖单一组分。通过薄层层析（TL
本研究主要利用黑曲霉发酵生产木聚糖酶。首先进行木聚糖酶的固体发酵条件优化，选用最适的固体发酵条件，为7g麸皮与3g玉米皮混合于250mL三角瓶中，28℃培养72h，测得所获粗酶液的木聚糖酶活性为1982.637U/g。利用制备的木聚糖酶粗酶液酶解玉米淀粉厂的加工副产物玉米皮，通过优化酶解条件，获得的最适酶解条件为：15g潮湿玉米皮底物（干重4.09g），加入木聚糖粗酶液3mL，50℃酶解8h。在此