水稻白叶枯病原菌Xoo中RaxM与MutL互作对raxX表达调控的影响

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革兰氏阴性菌稻黄单胞菌白叶枯致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)是导致水稻感染白叶枯病的病原菌。当Xoo侵染表达XA21的水稻时,部分菌株侵染力很弱,水稻对其表现出抗性。这是由于这些菌株中有无毒蛋白Avr XA21的存在。水稻体内的xa21编码一种类受体激酶,该受体可在识别到Avr XA21入侵植物后被激活,向下游传递信号、引起植物一系列防御反应,抵抗病原菌的入侵。在Xoo基因组中,raxX编码Avr XA21。通过预测发现,raxX上游启动子区还编码一个功能未知的蛋白RaxM。本实验室前期研究发现,RaxM在转录水平调控raxX的表达,进而调控Xoo的致病力,但RaxM并不直接调控raxX的表达。本研究的目的是探究RaxM通过何种途径调控raxX的表达,从而影响Xoo与水稻的亲和能力,主要研究结果如下:(1)RaxM互作蛋白的筛选与鉴定:通过酵母双杂交筛库、蛋白pull-down实验发现,RaxM与DNA错配修复蛋白MutL存在相互作用关系,推测RaxM可能通过与MutL作用,调控raxX的表达。(2)mut L缺失突变体致病性效应分析:比较mut L缺失突变体和野生型菌株在XA21水稻上的致病力发现:与野生型相比,Δmut L接种XA21水稻的病斑长度显著增加,略短于Δrax M。该实验结果可证明,MutL参与了RaxM对Avr XA21表达调控的通路,可能与Avr XA21的表达或活性相关。(3)MutL对raxX表达量调控分析:为证实MutL对raxX的正调节作用,我们进行了启动子活性分析。结果显示,mut L缺失导致raxX表达量下降。以上结果说明,MutL在RaxM调控raxX表达中起到重要的作用,这为进一步阐明水稻白叶枯病致病机理提供了理论基础。
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