目的:本课题主要是研究关黄柏的对照提取物制备工艺,建立关黄柏对照提取物的质量标准,并以之为对照品测定药材及其制剂中多个成分含量。方法:对关黄柏的对照提取物进行制备工艺研究,建立并验证含量测定方法,包括:(1)系统适用性试验:通过考察对照品溶液中盐酸药根碱,盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的理论塔板数,分离度和拖尾因子来确定色谱系统的性能是否能满足分析要求,最终确定合适的系统适应性参数;(2)单一活性成分浓度线性关系试验:通过配置一系列包含单一活性成分药物溶液进行研究,通过进样色谱图得到相应主峰峰面积响应值对主峰浓度按最小二乘法进行线性回归,考察单一活性成分在相关浓度范围内的线性关系;(3)准确度试验:通过测定空白加标后的供试品溶液中的主成分的含量,与加入含量的比值来计算回收率;(4)精密度试验:通过测定100%含量水平下的一个样品连续6次进样的峰面积变化,来评价方法的重复性;(5)检测限试验:根据单一活性成分在适当浓度时色谱峰信号与空白处基线噪音的信噪比来确定;(6)稳定性试验:通过考察同一份现配溶液,测试溶液在30天内的稳定性。考察对照提取物含量测定的相关影响因素,包括:药材粉碎度、提取时间、提取次数、提取溶剂、提取收率、制备条件、色谱进样量、色谱填料粒径、制备收率、干燥条件,进行对照提取物的制备,进而建立关黄柏对照提取物的质量标准,并以其为对照品测定药材及其制剂中多个成分的含量。结果:关黄柏主要生物碱类化学成分为:小檗碱、巴马汀和药根碱,这三种单一活性成分均能符合系统适用性、浓度线性关系、准确度、精密度、检测限、稳定性要求。通过检验20个批次的药材含量,制定关黄柏药材的含量质量标准为:关黄柏药材含药根碱不低于0.02%,巴马汀不低于0.3%,小檗碱不低于0.6%。采用对照提取物作为对照品检测癣宁搽剂的盐酸小檗碱含量可行。结论:本实验研究建立并验证了关黄柏相关活性成分的含量测定方法,优化了2010版药典的关黄柏测定方法,对洗脱梯度做出微小调整,并达到了较好的分离效果。成功建立了关黄柏对照提取物新的质量标准,在2010版药典的基础上,增加了药根碱的含量测定标准,并以之为对照品对成方制剂进行了含量测定,结果达到预期目的。