选题依据近年来,不育症发病呈上升趋势,其中畸形精子症患者占不育症患者的比例逐渐升高;畸形精子症临床中比较常见,其已知病因复杂多样,但其发病机制并不十分清楚,治疗方面尚未能达成一致,现代医学无针对性治疗药物,中医药治疗本病取得了良好疗效。导师王伊光认为畸形精子症同少弱精子症相同,都以肾虚为主要病机,包括肾气不足、肾阴虚、肾阳虚。肾气推动着天癸正常运行,肾阴濡养肾精,肾阳温煦、推动着精子的形成。导师认为治疗畸形精子症在中医宏观辨证的基础上可以结合西医病因进行微观辨证,其在中医治疗中常辨证为湿热,湿热蕴结,久之导致瘀血的病理因素,最终都导致畸形精子症。故导师认为畸形精子症以肾虚为本,湿热为标,治疗上谨守病机,补肾清热利湿,根据情况佐以活血,临床中常选用补肾利湿方治疗畸形精子症,取得较好疗效。为进一步研究补肾利湿方发挥作用的机制,为临床提供实验基础,选用本方进行实验研究,以明确其改善畸形精子症的途径,为以后治疗提供依据。研究目的本实验采用雷公藤多苷建立畸形精子症大鼠精核蛋白异常模型,通过观察补肾利湿法组方对大鼠的一般情况、精液质量、精子形态、睾丸病理、精核蛋白含量及其mRNA的表达,探讨补肾利湿法组方对大鼠上述指标的影响,并初步探讨其机制,为临床提供实验依据。研究方法取SPF级SD成熟雄性大鼠60只,随机分为2组,实验组50只,空白对照组10只;实验组随机分为模型组、阳性对照组、低剂量组、中剂量组及高剂量组,每组10只。空白对照组给予生理盐水18ml/kg体重灌胃8周;其余各组予新鲜配制雷公藤多苷水剂30mg/(kg·d)灌胃8周;第五周时阳性对照组予维生素E 25mg/kg体重灌胃,高、中、低剂量组分别给予补肾利湿方(生地黄15g,山萸肉12g,山药12g,茯苓15g,丹皮12g,泽泻9g,黄柏9g,黄芪20g,炒白术15g,菟丝子9g,女贞子12g,沙苑子12g,淫羊藿9g,车前子12g,覆盆子12g,萆薢9g,金银花9g,白花蛇舌草12g)浓缩液9、18、27g生药/kg体重;均为每日一次,共四周。各组大鼠在末次给药24h后处死取材,分别进行精液常规、精子形态学、睾丸病理、精核蛋白含量及mRNA表达检测。研究结果1.各组大鼠体重无明显差异(P<0.05);高剂量组大鼠睾丸体重比率明显高于低剂量组、阳性对照组、模型组、空白组差异有统计学意义(P<0.05),2.高剂量组大鼠精子活力明显高于模型组、低剂量组,空白组明显高于低剂量组、模型组;差异有统计学意义(P<0.05);高剂量组大鼠精子密度明显高于低剂量组、阳性对照组、模型组,空白组明显高于低剂量组、阳性对照组及模型组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组畸形精子比率明显高于其余组,差异有统计学意义(P<0.05)。3.除空白组外其余各组均有不同程度的曲细精管、间质细胞、支持细胞的改变,生精细胞层数及数量的减少,按损伤程度划分,模型组>低剂量组>中剂量组>阳性对照组>高剂量组>空白组。4.模型组、低剂量组精核蛋白P1相对表达量低于高剂量组;除高剂量组外其余各组均低于空白组;精核蛋白P2相对表达量低剂量组、阳性对照组明显低于空白组;差异有统计学意义(P<0.05)。5.高剂量组精核蛋白P1 mRNA明显高于对照组、低剂量组、中剂量组、阳性对照组;对照组精核蛋白P2 mRNA表达量低于空白组;差异有统计学意义(P<0.05)。结论(一)补肾利湿方能改善SD大鼠睾丸曲精小管结构,保护睾丸间质细胞及支持细胞,减少生精细胞的凋亡。(二)补肾利湿方对SD大鼠精子活力、密度、畸形精子比例有改善作用。(三)补肾利湿方能提高SD大鼠精子中精核蛋白P1及其mRNA表达,并且通过此途径降低畸形精子的比例。