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本研究旨在探讨不同水平硒(Se)的添加对小鼠巨噬细胞RAW264.7和SPF级昆明小鼠免疫应激的缓解效应并分析其可能机制。试验一:Se对LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7的免疫应激缓解效应及机制分析本试验旨在考察LPS免疫应激对小鼠巨噬细胞RAW264.7硒蛋白基因表达影响,分析硒蛋白基因在免疫调控中的可能作用。采用LPS诱导RAW264.7巨噬细胞免疫应激,在此基础上,细胞用不同浓度亚硒酸钠(0、0.5、1.0、1.5和2.0μmol/L,SS)预处理2 h,再采用LPS处理3 h,收集细胞,考察24个硒蛋白基因和9个炎性相关基因。研究结果如下:1)100 ng/mL LPS有效的诱导了(P<0.05)炎性细胞因子IL-6和TNF-α的分泌,并上调(P<0.05)细胞中9个炎症相关基因表达;2)LPS(100 ng/m L)免疫应激下调(P<0.05)RAW264.7细胞中18个硒蛋白基因,上调(P<0.05)2个硒蛋白基因(TXNRD1和TXNRD3)的表达;3)LPS免疫应激条件下,培养基中添加SS预处理不同程度下调(P<0.05)7个(COX-2、ICAM-1、IL-1β、IL-6、IL-10、iNOS和MCP-1)、上调(P<0.05)2个(IFN-β和TNF-α)炎症相关基因的表达,1.5μmol Se/L SS表现出最佳保护作用;4)与此同时,SS预处理呈剂量依赖性恢复(P<0.05)3个硒蛋白基因(GPX1、SELENOH和SELENOW)的表达,而5个硒蛋白基因(SELENOK、SELENOM、SELENOS、SELENOT和TXNRD2)只在高浓度Se水平(2.0μmol/L)添加是才能恢复其表达(P<0.05)。总体而言,LPS免疫应激普遍下调小鼠巨噬细胞RAW264.7硒蛋白基因表达,SS的添加主要通过调控少数几个硒蛋白基因表达而缓解细胞免疫应激,其中GPX1、SELENOH和SELENOW值得关注。试验二:新型有机硒(Se O)对LPS诱导小鼠免疫应激的缓解效应及脾脏组织硒蛋白基因表达影响研究试验二考察LPS免疫应激对昆明小鼠组织中硒蛋白基因表达影响,并考察日粮中新型有机硒(硒代蛋氨酸羟基类似物,Se O)不同水平添加是否可以缓解小鼠LPS诱导的免疫应激。试验选用90只3周龄9.5-11 g的SPF级雄性昆明小鼠,预饲3 d,随机分成5处理,每个处理6个重复,每个重复3只。5个处理组为:对照组、LPS组、0.15 mg Se/kg+LPS组、0.30 mg Se/kg+LPS组、0.45 mg Se/kg+LPS组。对照组和LPS组饲喂基础日粮,试验组日粮在基础日粮上添加不同水平Se O。分别于14 d、28d腹腔注射LPS(3 mg/kg BW)一次,对照组注射生理盐水。28 d注射6 h后,采集血液样和组织样。试验结果如下:1)LPS注射可有效诱导小鼠产生免疫应激:降低(P<0.05)21 d BW和(P<0.05)14-21 d ADG,引起脾脏组织氧化应激,增加(P<0.05)28 d脾脏指数和(P<0.05)血浆中炎性因子IL-6和TNF-α含量,上调(P<0.05)28 d肝脏和脾脏中8个炎性相关基因(COX-2、ICAM-1、IL-1β、IL-6、IL-10、iNOS、MCP-1和TNF-α)表达;2)LPS诱导的小鼠免疫应激伴随着肝脏中17个,脾脏中16个硒蛋白基因下调(P<0.05)表达,肝脏和脾脏中3个硒蛋白基因上调(P<0.05)表达;3)在LPS免疫应激条件下,日粮中Se O的添加不同程度缓解了小鼠免疫应激,与LPS组相比,Se O添加一定程度增加了小鼠14-21 d ADG、降低(P<0.05)了28 d脾脏指数、增加(P<0.05)了脾脏GSH-Px活性,降低(P<0.05)血浆中炎性因子表达,并不同程度下调(P<0.05)肝脏中4个(COX-2、IL-1β、iNOS和TNF-α)和脾脏中5个(COX-2、ICAM-1、IL-6、MCP-1和TNF-α)炎性相关基因表达,上调(P<0.05)肝脏中3个(IL-6、IL-10和MCP-1)和脾脏中2个(IL-10和iNOS)炎性相关基因表达。其中0.30 mg Se/kg Se O添加组缓解免疫应激效果最佳;4)与LPS组相比,日粮中Se O的添加不同程度上调了(P<0.05)肝脏中4个(GPX1、SELENOF、SELENOM和SELENOT)和脾脏中8个(DIO2、GPX1、GPX3、SELENOF、SELENOI、SELENOK、SELENOS和SELENOT)硒蛋白基因的表达。总体而言,LPS免疫应激普遍下调小鼠肝脏和脾脏硒蛋白基因表达,Se O的添加主要通过调控肝脏和脾脏中少数几个硒蛋白基因表达而缓解小鼠免疫应激。